Question

预防乙肝最有效的途径是接种疫苗。将乙肝表面抗原基因转移到植物细胞内可生产乙肝疫苗。回答下列问题。

（1）欲在短时间内大量扩增乙肝表面抗原基因。通过______（填写中文名称）技术，其原理是_______，利用该技术扩增乙肝表面抗原基因的前提是________。

（2）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，此外采用_____法十分简便经济。用抗原——抗体杂交技术检测植物细胞是否成功合成乙肝表面抗原蛋白，若有_______出现，表明目的基因已形成蛋白质产品。

（3）将乙肝表面抗原基因导入植物细胞后，采用_______技术获得愈伤组织，该技术需在_______条件下进行。

（4）乙肝疫苗在2～8℃条件下保存，其不宜在常温下保存最可能的原因______。

Answer

多聚酶链式反应 DNA双链复制 要有一段已知目的基因的核苷酸序列 花粉管通道 杂交带 植物组织培养 无菌和人工控制 乙肝疫苗的化学本质是蛋白质，在常温下保存易变性失活

【解析】试题分析：基因工程技术的基本步骤：目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）根据提供信息分析可知，乙肝表面抗原基因是目的基因，其化学本质是DNA，可以通过PCR技术（多聚酶链式反应）进行扩增，其原理是DNA分子双链的复制，前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列。

（2）将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法，此外还有花粉管通道法、基因枪法等，其中花粉管通道法十分简便经济。可以用抗原抗体杂交法检测植物细胞是否成功合成乙肝表面抗原蛋白，若出现了杂交去，说明该目的基因已经成功表达，产生了相应的蛋白质。

（3）导入目的基因的植物细胞，可以在体外利用组织培养技术获得愈伤组织。

（4）乙肝疫苗的化学本质是蛋白质，在常温下保存易变性失活，所以一般在2～8℃条件下保存。