Question

苯酚是工业生产排放废水中的一种有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。研究人员欲从土壤中筛选获得能降解苯酚的细菌菌株，请回答下列问题：

（1）在培养基中应加入苯酚作为唯一___________，该培养基可使能降解苯酚的细菌生长，而阻止其他微生物生长，这种培养基称做_______________培养基。

（2）为获得单菌落进行继续筛选，可采用平板划线法利用____________（接种工具）把目的菌株接种到培养皿中，操作时采用_________灭菌的方法，接种后应将培养皿______________，并放入培养箱中培养。

（3）培养一段时间后，在培养基表面形成多个单菌落，不同菌株降解苯酚能力有差异，为选出降解能力强的菌株，具体思路是______________________________________。

（4）为保证所得菌种的纯净，需要进行菌种的保存，我们可以采取临时保藏的方法。先将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养。当菌落长成后，将试管放入4℃冰箱中保藏，这种保存方法的缺点是_____________________________________。

Answer

碳源 选择 接种环 灼烧 倒置 用苯酚含量相同的培养液分别培养各菌株，培养相同时间后测定培养液中苯酚含量 保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异

【解析】试题分析：从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．选择分离过程中需要使用选择培养基，做到全过程无菌操作。常用的固体培养基上的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。

（1）题目中所筛选的细菌“只能”降解苯酚，故可采用以苯酚为唯一碳源的选择培养基筛选，该培养基中其他微生物不能生长。

（2）在平板划线法过程中，利用接种环接种，每次接种前后接种环都要进行灼烧灭菌；接种后应将培养皿倒置，并放入培养箱中培养。

（3）选出降解苯酚能力强的菌株的具体思路是：用苯酚含量相同的培养液分别培养各菌株，培养相同时间后测定培养液中苯酚含量。

（4）当菌落长成后，将试管放入4℃冰箱中保藏，但是这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。