Question

【生物——选修1：生物技术实践】

雅安市城区居民用水取自于青衣江上游，为保障居民用水安全，相关单位需要定期检测水源中细菌种类及数量，以确定水质是否达标。请回答下列问题：

（1）制备牛肉膏蛋白胨培养基的步骤是计算→称量→熔化→灭菌→________。其中对培养基灭菌的方法是_________。为避免杂菌污染，倒平板时应当在__________进行。

（2）培养基中的牛肉膏主要为细菌提供__________营养成分。培养细菌的pH应调节至_________。

（3）要统计水源中的活菌总数，应该采用的方法是__________。工作者将三个接种了等量水源水的培养基置于37℃的恒温箱中培养。24小时后观察到三个平板上的菌落数目为21、256、215，请分析结果出现的可能原因并提供解决方案：___________________。

Answer

倒平板 高压蒸汽灭菌 酒精灯火焰旁 碳源、氮源（无机盐） 中性或微碱性 稀释涂布平板法 原因：涂布第一个平板时涂布器未冷却就涂布平板；（后两个平板被污染；操作失误）（其他合理答案均可）方案：重做实验

【解析】试题分析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板；常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌；微生物的分离是研究和利用微生物的第一步，也是微生物工作的基本方法和重要环节；接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。

（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤是：计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板。培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌；为避免杂菌污染，倒平板时应当在酒精灯火焰旁进行。

（2）牛肉膏和蛋白胨含有丰富的蛋白质,可提供细菌需要的碳源和氮源；多数细菌适宜在中性或碱性条件下生长，所以培养细菌的pH应调节至中性或微碱性。

（3）微生物的常用接种方法包括平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可以用于菌种的计数。题中三个菌落的数量偏差太大，可能是因为涂布第一个平板时涂布器未冷却就涂布平板了。