Question

高浓度酒精会抑制酵母菌活性，因而在米酒制作中，要筛选耐酒精能力较强和发酵性能优良的酵母菌。回答下列问题：

（1）为了解发酵液中酵母菌的数量，可采用________________法接种。若将1mL发酵液稀释10⁵倍，在三个平板上分别接入0.2mL稀释液，经适当培养后，三个平板上的菌落数分别为33、38、37，则1mL发酵液中有__________个酵母菌。

（2）若用同一套装置和材料进行果酒、果醋发酵实验，应先进行___________（填“果酒”或“果醋”）发酵。用____________检测酒精，在酸性条件下呈现灰绿色。

（3）耐酒精能力实验：实验小组准备了液体培养基、酒精和其它材料用具，测定三种品系酵母菌（分别标记为Y₁、Y₂、Y₃）对体积分数为6%、8%、10%、12%的酒精耐受能力。补充实验思路。

第一步：_______________________________________________________________。

第二步：使用一定的方法收集各组酵母菌产生的气体，记录产气量，比较三种品系酵母菌耐酒精能

（4）发酵性能测定：将三种品系酵母菌分别接种于含有相同发酵液的发酵瓶后，称重发酵瓶。称前拧松瓶盖，轻轻摇晃瓶子。随着发酵时间的延续，瓶重逐渐减轻。测定结果如下图所示。

①瓶重减轻量即为酵母菌在酒精发酵中产生的_____________的量。

②据图分析，Y₁比Y₃更适合作为生产米酒的菌种，理由是___________________。

Answer

稀释涂布平板 1.8×107 果酒 重铬酸钾 将等量的三种品系酵母菌分别接种在酒精浓度为6%、8%、10%、12%的液体培养基中 CO2 Y1菌在1-4天（前期/初期）的失重量（产生CO2的量/发酵速率/发酵能力）大于Y3（Y3前期发酵能力不如Y1）

【解析】试题分析：常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，微生物计数公式为每毫升样品中的细菌数量=平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数。

（1）微生物常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可以用于酵母菌的技数。每毫升样品中的细菌数量=平板上菌落数的平均值÷体积×稀释倍数=（33+38+37）÷3×105÷0.2=1.8×107个。

（2）若用同一套装置和材料进行果酒、果醋发酵实验，应该先密封进行无氧呼吸产生酒精，再通入氧气进行有氧呼吸，产生醋酸。酒精可以用酸性重铬酸钾进行检测，产生灰绿色反应。

（3）根据实验目的和实验提供的材料设计实验：将等量的三种品系酵母菌分别接种在酒精浓度为6%、8%、10%、12%的液体培养基中；使用一定的方法收集各组酵母菌产生的气体，记录产气量，比较三种品系酵母菌耐酒精能力。

（4）①酒精发酵的产物是二氧化碳和酒精，其中酒精仍然在装置中，二氧化碳释放出去了，所以瓶重减轻量即为酵母菌在酒精发酵中产生的二氧化碳的量。

②据图分析，Y1菌在1-4天）的失重量（产生CO2的量）大于Y3，所以Y1比Y3更适合作为生产米酒的菌种。

【点睛】本题难度适中，考查了探究酵母菌种群数量变化的实验、探究酵母菌进行酒精发酵的适宜温度的实验，属于考纲中理解、应用层次的考查，考生在解答过程中要善于利用单一变量的理念分析设计实验表格，酵母菌数量的计算是考生的难点，在计算过程中要善于利用公式，平时练习过程中应加强此方面的训练。