Question

【加试题】回答下列（一）、（二）小题。

(一）某研究小组欲用苹果汁为原料，利用发酵瓶制作果酒和果醋，请分析回答：

(1)将苹果汁放入发酵瓶，要预留约_________的空间。为得到酒精和糖含量较高的果酒，可在果汁中加入一定比例的_______。若发酵瓶内持续无气泡产生，则需加入更多的________，使发酵作用尽快发生。

(2)变酸的果酒表面有一层醋杆菌形成的菌膜，若要在该菌膜中筛选高表达量的醋杆菌菌株，可通过获得________的方法来分离筛选。若要统计获得菌种的数目，则常采用__________法。对获得的优质醋杆菌菌种常用划线法接种在固体培养基_______上低温保存。

(3)下图是果酒和果醋的发酵装置，关于果醋发酵叙述错误的是________

A.发酵前，瓶内酒—水混合物的pH需调至7.0

B.发酵过程中，充气口要适时适量充气

C.发酵过程中，排气口排出醋酸发酵产生的CO₂

D.发酵完成后，出料口的pH值不再减少

(二）请回答杂交瘤技术和单克隆抗体制备的有关问题。

(1)杂交瘤技术制备单克隆抗体时，利用一定的物质，如生物诱导剂______作介导，使经免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出融合的细胞再进行细胞的_______培养，获得纯系细胞，同时还要进行____检验，以保证获得的是所需的特定杂交瘤细胞。

(2)获得杂交瘤细胞后，在体外培养时需要特别加入的天然成分是___________。

(3)有关杂交瘤细胞体外培养的叙述，正确的是_________

A.用固体培养基培养          B.用滋养层细胞支持生长

C.能进行传代培养            D.需要对细胞进行研磨破碎获得产物

(4)现在欲利用基因工程技术生产单克隆抗体，科研小组将与抗体形成有关的关键基因通过噬菌体导人到受体细胞，该技术的核心步骤是_________,噬菌体是这些关键基因的____________。

Answer

1/3 蔗糖 酵母菌 单菌落 涂布分离 斜面 C 灭活的（仙台）病毒 克隆 抗体 动物血清 C 形成重组DNA分子 载体

【解析】【试题分析】

（一）在果酒制作过程的前期通入空气要在发酵瓶中留有一定的空间（大约1/3），可以给酵母菌提供氧气，使其进行有氧呼吸，为酵母菌的生长、增殖提供能量，酵母菌迅速增殖，缩短发酵时间；能够测定样品中活菌数的方法是稀释涂布平板法；临时保藏的菌种一般是用划线法把菌种接种到试管的固体斜面培养基上低温保存。

（二）（1）诱导动物细胞融合的方法有：聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等；在单克隆抗体制备过程中，一般认为有两次筛选过程，第一次是筛选出杂交瘤细胞(用选择培养基)，第二次是进一步筛选出能产生人们所需要抗体的杂交瘤细胞。

（2）动物细胞培养过程中，除正常的有机和无机营养外，还需加入血清、血浆等一些天然成分。

（一）（1）在果酒制作过程中，将苹果汁放入发酵瓶，要预留约1/3的空间；为得到酒精和糖含量较高的果酒，可在果汁中加入一定比例的蔗糖；若发酵瓶内持续无气泡产生，则说明酵母菌数量较少，需加入更多的酵母菌，使发酵作用尽快发生。

（2）若要在果酒表面有一层醋杆菌形成的菌膜中筛选高表达量的醋杆菌菌株，可通过获得单菌落的方法来分离筛选；若要统计获得菌种的数目，则常采用涂布分离法；对获得的优质醋杆菌菌种常用划线法接种在固体培养基斜面上低温保存。

（3）发酵前，瓶内酒—水混合物的pH需调至7.0，以缩短制作果醋的周期，A项正确；醋酸发酵为有氧发酵，所以发酵过程中，充气口要适时适量充气，B项正确；排气口是在酒精发酵时用来排出CO2的，C项错误；出料口是用来取样的，当出料口的pH值不再减少时，说明发酵已经完成，D项正确。

（二）（1）制备单克隆抗体时，可利用生物诱导剂灭活的（仙台）病毒介导，使经免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合；为保证获得的是所需的特定杂交瘤细胞，筛选出融合的细胞后需再进行细胞的克隆化培养，获得纯系细胞，同时还要进行抗体检验。

（2）获得杂交瘤细胞后，在体外培养时需要特别加入的天然成分是动物血清。

（3）动物细胞培养需用液体培养基，A项错误；细胞克隆需要以滋养细胞（如经射线照射本身失去增殖能力的小鼠成纤维细胞）提供营养支持生长，B项错误；杂交瘤细胞在适宜条件下能无限增殖，所以能能进行传代培养，C项正确；杂交瘤细胞产生的抗体会分泌到培养液中，所以不需要对细胞进行研磨破碎获得产物，D项错误。

（4）基因工程的核心步骤是形成重组DNA分子；噬菌体可在基因工程中作为目的基因的载体。