Question

环磷酰胺（CP)是常用的化疗药物，研究表明CP对遗传物质具有损伤效应，可导致染色体结构变异产生微核。现欲以微核率（含微核的细胞数占观察细胞总数的比例）为检测指标，探究轮叶党参醇提取物水溶部分（WACL)的浓度和给药顺序对CP所致突变的拮抗作用，请根据以下提供的实验材料，提出实验思路并进行分析。

材料与用具：大鼠外周血淋巴细胞悬液，动物细胞培养液，浓度为4mg/mL的WACL溶液，20μg/mL的CP溶液，生理盐水，培养瓶若干个，显微镜，血细胞计数板等。[要求与说明：微核是丧失着丝粒的染色体断片于末期之后单独形成的一个或几个规则的次核（如图）；染色和制作装片的具体方法不作要求；实验条件适宜。]

请回答：

(1)实验思路（其中实验分组用表格形式表示)

①

②

③

(2)分析与讨论

①异常细胞的细胞周期中，观察计数微核的最佳时期应是_________。

②若本实验所得结果如下图所示。

据此可以得出的结论是：a.________； b._________。

Answer

①利用浓度为4mg/mL的WACL溶液配置成0.25mg/mL、1mg/mL的溶液。

②取11个培养瓶，并编号，并在瓶中加入等量且适量的大鼠外周血淋巴细胞悬液和培养液。

③实验分组；浓度和加药顺序表中位置可合理互换；只写前三行，另附加语言“另设只加生理盐水、CP对照组”也得分

表：给药顺序和WACL对CP所致突变拮抗作用的实验分组

④按上述分组，在各培养瓶中加入等量的相关溶液，培养一段时间。

⑤取各培养瓶中培养液，在显微镜下统计微核细胞数和细胞总数，记录结果并计算微核率。 间期 a.不同浓度的WACL均对CP所致突变有拮抗作用

b.中低浓度先加WACL的效果好于其他两种加药顺序

【解析】试题分析：依据实验遵循的单一变量原则，由题意和反映实验结果的柱形图所呈现的信息确定实验目的，找出实验变量（自变量、因变量、无关变量），在此基础上来对实验组和对照组进行设置，进而进行相关问题的解答。

(1)依题意可知：本实验目的是探究轮叶党参醇提取物水溶部分（WACL)的浓度和给药顺序对CP所致突变的拮抗作用，因此自变量是党参醇提取物水溶部分（WACL)的浓度和给药顺序，因变量是观察统计含微核的细胞数占观察细胞总数的比例，即微核率。其它对实验结果有影响的无关变量应控制相同且适宜。分析柱形图所呈现的信息，根据实验设计遵循的对照原则，可知：（一）在探究轮叶党参醇提取物水溶部分(WACL)对环磷酰胺(CP)所致突变的拮抗作用时，需设置WACL浓度为0.25mg/mL、1mg/mL、 4mg/mL的三个实验组，以及只加生理盐水和只加CP的对照组。（二）为探究给药顺序对实验结果的影响，在相同的CP浓度、相同的WACL浓度下，又需设置给药顺序为：①先加CP、后加WACL，②先加WACL、后加CP，③同时加入WACL和CP的三组。综合（一）和（二），共需取11个培养瓶用来体外培养大鼠外周血淋巴细胞。详细的实验步骤如下：

①利用浓度为4mg/mL的WACL溶液配置成0.25mg/mL、1mg/mL的溶液。

②取11个培养瓶，并编号，并在瓶中加入等量且适量的大鼠外周血淋巴细胞悬液和培养液。

③实验分组：给药顺序和WACL对CP所致突变拮抗作用的实验分组如下表：

④按上述分组，在各培养瓶中加入等量的相关溶液，培养一段时间。

⑤取各培养瓶中培养液，在显微镜下统计微核细胞数和细胞总数，记录结果并计算微核率。 (2) ①由题意“微核是丧失着丝粒的染色体断片于末期之后单独形成的一个或几个规则的次核”可知：异常细胞的细胞周期中，观察计数微核的最佳时期应是间期。

②分析柱形图呈现的信息可知，本实验可以得出的结论是： a.不同浓度的WACL均对CP所致突变有拮抗作用；b.中低浓度先加WACL的效果好于其他两种加药顺序。

【点睛】在书写实验步骤一般按照“分组编号→自变量控制→相同且适宜条件培养→因变量检测”的思路进行；实验结论的得出，应从分析实验变量与结果间的逻辑关系入手，实验结论应该描述为自变量导致因变量（即实验结果）的产生”这一对实验结果进行描述的基本模式。