Question

下表为几种限制酶识别的序列和切割的位点。如下图，己知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRI或PstI的酶切位点。现用PstI和EcoRI两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是

A．1为EcoRⅠ,2为BamHI,3为EcoRI,4为PstI

B．1为BamHI，2为EcoRI,3为EcoRI,4为PstI

C．1为BamHI,2为EcoRI,3为PstI,4为EcoRI

D．1为EcoRI,2为PstI，3为PstI,4为BamHI

Answer

C

【解析】由题意可知先用PstI和EcoRI两种酶同时切割该DNA片段。如果1为EcoRⅠ,2为BamHI,3为EcoRI,4为PstI将会在1和 3处将目的基因切割，会产生相同的黏性末端，A错误。如果1为BamHI，2为EcoRI,3为EcoRI,4为PstI，将在2和 3处将目的基因切割，产生的是黏性末端，B错误。如果1为BamHI,2为EcoRI,3为PstI,4为EcoRI在2和3切割目的基因，此时产生的黏性末端不同，可以防止环化，C正确。如果1为EcoRI,2为PstI，3为PstI,4为BamHI会在2和3位置切割掉目的基因，产生的相互的黏性末端，D错误。

【考点定位】本题考查基因工程育种相关知识，意在考察考生对知识点的理解和对题意分析能力。