Question

回答以下有关生物技术实践的问题：

（1）微生物接种前要对培养基进行         处理，常用的接种方法是            和             ，其对应的接种工具分别是             和             。

（2）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制               培养基（按用途分类），该培养基中需要加入纤维素粉作为唯一的               。在将样品进行梯度稀释时，要用到10¹倍稀释的样品，需用无菌吸管吸取1ml菌悬液至盛有9ml          的试管中。

（3）在植物组织培养中，采用的MS固体培养基中除含有大量元素和微量元素外，通常还需添加植物激素，其中主要是           和         ，当这两种激素同时使用的时候可以提高              。在进行接种之前，要对外植体进行表面消毒时，既要考虑药剂的效果，还要考虑外植体的             。

（4）通常要将提取的胡萝卜素粗品通过           法进行鉴定，下图为其结果示意图，A、B、C、D四点中，属于标准样品的样点是                 ，请问乙代表的物质是                 。

Answer

（1）高压蒸汽灭菌 平板划线法 稀释涂布平板法 接种环 涂布器 （填对应才给分）

（2）选择 碳源 无菌水

（3）生长素 细胞分裂素 分化频率 耐受能力

（4）纸层析 AD 其他色素和杂质

【解析】（1）微生物接种前要对培养基进行高压蒸汽灭菌处理，用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。对应的接种工具分别是接种环和涂布器。

（2）从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制只含有纤维素唯一碳原的选择培养基。在将样品进行梯度稀释时，要用到101倍稀释的样品，需用无菌吸管吸取1ml菌悬液至盛有9ml无菌水的试管中。

（3）采用的MS固体培养基中除含有多种大量元素和微量元素外，还需添加植物激素，植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强趋势．同时使用这两种激素可以提高分化频率．在进行接种之前，要对外植体进行表面消毒时，既要考虑药剂的效果，还要考虑外植体的耐受能力．

（4）通常要将提取的胡萝卜素粗品通过纸层析法进行鉴定，提取的胡萝卜素粗品中会有杂质，层析时会留下痕迹，而标准样品没有杂质，层析时不会留下杂质痕迹，所以，A和D属于标准样品．乙代表的物质是其他色素和杂质。

【考点定位】微生物的培养和分离、从生物材料中提取某些特定成分

【名师点睛】1、微生物常见的接种的方法

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

2、胡萝卜素的提取：

（1）胡萝卜素的性质：胡萝卜素是橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂．

（2）胡萝卜素的提取来源：提取天然胡萝卜素的方法主要有：一是从植物中提取；二是从大面积养殖的岩藻中荻得；三是利用微生物的发酵生产．

（3）萃取剂：最适宜作胡萝卜素萃取剂的是石油醚．

（4）实验流程：胡萝卜→粉碎→干燥→萃取（石油醚）→过滤_→浓缩→胡萝卜素→鉴定（纸层析法）．