Question

用农杆菌转化法可以获取转基因抗病植物，回答有关问题：

（1）若该抗病基因取自某种真菌的CDNA文库，转入植物细胞后，       （能、否）正常表达。若想短时间内得到大量的抗病基因，需用到        技术，中文全称为       ，条件除了原料、能量、模板外还需要          、         。

（2）某培养基中的卡那霉素会抑制愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的植物细胞，应使构建的基因表达载体中含有       基因，作为         基因。

（3）农杆菌是一种在        中生活的微生物，能在自然条件下感染     和        植物，其原因是该类植物受到损伤时，伤口的细胞会分泌大量的     ，吸引农杆菌移向这些细胞。

（4）Ti质粒的T—DNA（可转移的DNA）可整合到植物细胞中        上，所以，构建基因表达载体时，将目的基因插入到          中。用到的工具酶有             。

Answer

（1）能 PCR 多聚酶链式反应 引物 Taq（或热稳定DNA聚合）

（2）抗卡那霉素基因 标记

（3）土壤 裸子植物 双子叶 酚类物质

（4）染色体DNA T—DNA序列 限制酶和DNA连接酶

【解析】（1）真菌的CDNA文库，转入植物细胞后能正常表达，短时间想获得大量的抗病基因，可以使用PCR技术，中文全称为多聚酶链式反应，需要原料、能量、模板、引物和热稳定DNA聚合酶等条件。

（2）欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有卡那霉素抗性基因，作为标记基因。

（3）在培育转基因植物时常用农杆菌转化法，农杆菌来源于土壤，自然条件下感染裸子植物和双子叶植物。一般情况下农杆菌不能感染的植物是单子叶植物，原因是其不含有能促进农杆菌移向植物细胞的酚类化合物。

（4）农杆菌的Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶。

【考点定位】基因工程的原理及技术