Question

受损伤的马铃薯细胞内酚氧化酶（PPO）和底物（酚类物质）直接接触,引起马铃薯的褐变。为探究温度对PPO活性的影响,实验小组进行如下实验。

（1）PPO粗提液的提取

低温下将新鲜马铃薯用蒸馏水洗净、去皮,取20 g样品放入含50 mL磷酸缓冲液（pH为5．5）的研钵中,同时加入少量石英砂,研磨、离心,上清液即为PPO的粗提液。加缓冲液研磨的目的是              。

（2）不同温度下PPO活性的测定

试管编号 步骤	1	2	3	4	5	6	7	8
加入PPO粗提液/mL	2	—	2	—	2	—	2	—
加入酚类底物/mL	—	2	—	2	—	2	—	2
反应	混合振荡	混合振荡	混合振荡	混合振荡
温度预处理（5 min）/℃	0	15	30	45
保温时间/min	5	5	5	5
记录结果	+	++++	++++	++

注:反应底物充足;实验结果中“+”越多,褐色越深

①实验步骤顺序有不妥之处,请改正:                   。

②实验结果表明:在温度为15 ℃和30 ℃的条件下,PPO具有相同的活性,从酶的特性分析其原因是           。

③为进一步探究PPO最适温度,应在        范围内设置温度梯度。

Answer

（1）研磨时细胞器破裂，会导致酶所处的环境pH降低，维持pH稳定,保持PPO的活性（防止PPO失活）

（2）①“反应”步骤改在“温度预处理”之后 ②在最适温度前后,酶可以有相同的催化效率 ③15～30 ℃

【解析】

试题分析：（1）缓冲液可以维持pH稳定,保持PPO的活性（防止PPO失活）。

（2）为保证酶在设定的温度下作用，应将“反应”步骤改在“温度预处理”之后。酶的活性随温度变化表现为“抛物线”，在最适温度前后,酶可以有相同的催化效率。

（3）在温度为15 ℃和30 ℃的条件下,PPO具有相同的活性,可以推测最适温度位于二者之间，进一步探究PPO最适温度,应在15～30 ℃范围内设置温度梯度。

考点：本题考查酶的作用特点，意在考查对酶特性的理解，考查相关实验的设计能力。