Question

空气中的微生物在重力等作用可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：

①配制培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H₂O）；

②制作无菌平板；

③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；

④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。

回答下列问题:

（1）培养基除为微生物生长提供水、无机盐外，还提供_____________。

（2）该培养基中的成分X通常是______________，步骤②中常采用的灭菌方法是_______________。

（3）步骤③中，实验组的操作是_______________。

（4）将各组平板置于37℃恒温箱中培养过程中，平板应倒置，其作用是_______________。

（5）若在调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落。对该实验数据的正确处理的方法是_______________，理由是____________________。

Answer

（1）碳源和氮源

（2）琼脂 高压蒸汽灭菌法

（3）将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间

（4）既可以防止皿盖上的水珠落入培养基，又可以避免培养基中的水分过快地挥发

（5）不予采用 实验操作中，发生了污染，数据不准确

【解析】（1）培养基中应该至少含有4种营养物质，分别为碳源、氮源、水和无机盐。

（2）要分离出该微生物，需要用固体培养基，故需要加入凝固器琼脂。

（3）实验探究的是教室内不同高度空气中微生物的分布，其中变量为不同高度，故需在不同高度下放置开盖平板．同时，为了保证单一变量，需要保证开盖放置时间一致；为了保证实验可靠，需要设置多个平行实验。培养基常用的灭菌方法为高压蒸汽灭菌法。

（4）平板应倒置，其作用是既可以防止皿盖上的水珠落入培养基，又可以避免培养基中的水分过快地挥发。

（5）在完全正确的操作情况下，空白对照组中不应出现菌落．若出现菌落，说明操作过程中存在微生物污染，属于实验失误，，数据不准确，所有实验数据均不应采用。

【考点定位】测定某种微生物的数量

【名师点睛】统计菌落数目的方法

（1）显微镜直接计数法

①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌。

（2）间接计数法（活菌计数法）。

①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

②操作

a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性。

b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。