Question

【生物一选修3：现代生物科技专题】

单克隆抗体的制备原理和方法如下图所示，这样制得的抗体为鼠源性抗体。

（1）在此过程中，小鼠必须经过                  才能获得所需的小鼠细胞；杂交瘤细胞的特点是                                  。单克隆抗体的应用包括用于治疗疾病、运载药物和                  等，上述应用的相关原理都涉及到                反应。

（2）这种抗体临床应用时，对人是异种蛋白质，重复注射可使人产生             ，从而减弱或失去疗效，并可引发过敏反应。

（3）在上世纪80年代早期，人们开始利用基因工程制备抗体，以降低鼠源抗体的免疫原性。进行基因改造时，应该把下图中的（用图中字母表示）            和         进行连接，以避免如（2）所提到的麻烦；进行改造的过程中要用的工具酶有                     。

（4）将改造好的基因与质粒进行构建，构建好的结构称为                            。

Answer

（1）注射（相应）抗原； 既能无限增殖又能产生特异性抗体；作为诊断试剂；

抗原—抗体杂交（或抗原—抗体特异性）

（2）抗体（1分）

（3）C、B（共2分，两空顺序可调换，有错不给分）； 限制酶和DNA连接酶（2分，只答一个得1分）

（4）基因表达载体（重组质粒，重组DNA）

【解析】（1）据图分析，在此过程中，要经过A注射相应抗原才能获得所需的小鼠细胞（即B淋巴细胞）。杂交瘤细胞的特点是既能无限增殖又能产生特异性抗体。单克隆抗体的应用包括用于治疗疾病、运载药物和作为诊断试剂等，上述应用的相关原理都涉及抗原—抗体杂交（或抗原—抗体特异性）。

（2）这种抗体临床应用时，对人是异种蛋白质，重复注射可使人产生该抗体的抗体，导致该抗体作用减弱或失去疗效，并可引发过敏反应。

（3）鼠源抗体是来自小鼠分泌的抗体，为了弱化其在人体内的抗原性，需要通过基因片段置换或者切除单抗基因中编码鼠源性的蛋白的片断。由图可知，鼠的抗体基因的D片段是就是编码鼠源性的蛋白的片断，需要将其用人的蛋白片段置换，也即用B置换D，所以进行基因改造时，应该把下图中的C和B进行连接。进行改造的过程中要用的工具酶有限制酶和DNA连接酶。

（4）将改造好的基因与质粒进行构建，构建好的结构称为基因表达载体（重组质粒，重组DNA）。

【考点定位】细胞融合与单克隆抗体；基因工程的原理及技术；人体免疫系统在维持稳态中的作用

【名师点睛】单克隆抗体制备过程的几个问题分析

(1)对动物免疫的原因：B淋巴细胞要经过免疫过程，即接触抗原，增殖分化为有特异性免疫功能的B淋巴细胞，才能产生相应的抗体，所以，与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际上是浆细胞。

(2)在单克隆抗体制备过程中，一般认为有两次筛选过程，第一次是筛选出杂交瘤细胞(用选择培养基)，第二次是进一步筛选出能产生人们所需要抗体的杂交瘤细胞。

(3)杂交瘤细胞具备双亲的遗传物质，不仅具有浆细胞产生特异性抗体的能力，还具有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的能力，从而可以克服单纯B淋巴细胞不能无限增殖的缺点，而大量生产单克隆抗体。