Question

图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点，amp^r表示氨苄青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是（    ）

A．图甲中的质粒用BamH I切割后，含有4个游离的磷酸基团

B．在构建重组质粒时，可用Pst I和BamH I切割质粒和外源DNA

C．用Pst I和HindIII酶切，可以防止质粒的自身环化

D．导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长

Answer

C

【解析】

试题分析：图甲中的质粒只有一个BamHⅠ切割位点，切割后形成一个直链DNA，含2个游离的磷酸基团，A错误； BamHⅠ切割位点在目的基因上，所以不能用该酶切割外源DNA，B错误；用PstⅠ和HindⅢ酶切质粒切成两个片段，用PstⅠ和HindⅢ酶能将外源DNA切成三段，只有含目的基因的片段通过DNA连接酶与质粒连接形成的重组质粒符合要求，而另一个重组质粒无目的基因，不符合要求，从而可以防止质粒的自身环化，C正确；导入目的基因的大肠杆菌，其重组质粒是用PstⅠ和HindⅢ酶切割的，其中的Ampr（氨苄青霉素抗性基因）已被破坏，D错误。

考点：基因工程

【名师点睛】根据题意和图示分析可知：质粒和外源DNA分子都含有三种限制酶切点，即限制酶BamHⅠ、PstⅠ和Hind III，其中BamHⅠ切割位点在目的基因上，所以不能用该酶切割外源DNA了．用PstⅠ和Hind III酶切质粒切成两个片段，用PstⅠ和Hind III酶能将外源DNA切成三段，只有含目的基因的片段通过DNA连接酶与质粒连接形成的重组质粒符合要求，而另一个重组质粒无目的基因，不符合要求．导入目的基因的大肠杆菌，其重组质粒是用PstⅠ和Hind III酶切割的，其中的Ampr（氨苄青霉素抗性基因）已被破坏，不能抗氨苄青霉素。