Question

某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。

（1）将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状（变异性状）的来源属于________。

（2）如果将抗盐基因直接导入烟草细胞，一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能________，也不能________。

（3）在构建重组质粒时，应选用________和________两种酶对_______和____        进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。

（4）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用               技术，经过____     和      进而形成完整植株，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加_____ _             。

（5）为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的________作探针进行分子杂交检测，又要用                   的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。

Answer

（1）基因重组

（2）复制 表达（合成抗盐基因的mRNA）

（3）SalⅠ HindⅢ 质粒 含抗盐基因的DNA

（4）植物组织培养 脱分化 再分化 植物激素（生长素和细胞分裂素）

（5）抗盐基因 一定浓度的盐水浇灌烟草植株（将烟草植株移栽到盐碱地中）

【解析】

试题分析：（1）转基因技术原理为基因重组。

（2）目的基因要通过运载体导入，才能在受体细胞稳定保存和复制、表达。

（3）构建重组质粒时，用SalⅠ、HindⅢ切割刚好切下目的基因，而BamHⅠ切割会破坏目的基因，用SalⅠ、HindⅢ切割质粒，保证质粒各有一个粘性末端和目的基因相同，以保证重组DNA序列的唯一性。

（4）将离体细胞培养成植株需要植物组织培养技术。该细胞经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化生成幼苗。在组织培养除了营养物质，还需要细胞分裂素和生长素。

（5）可以用放射性同位素标记目的基因的一条单链，作为DNA探针，进行分子杂交检测目的基因是否成功整合到是体细胞染色体DNA。又要在个体水平进行抗盐性检测实验，检测目的基因是否成功表达。

考点：基因工程和细胞工程