Question

已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产，乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡。因此，可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内，使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力。回答下列问題：

（1）为了获得丙种蛋白质的基因，在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上，推测出丙种蛋白质___________ 的序列，据此可利用____________方法合成目的基因。

（2）在利用上述丙种蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中，常需要使用____________酶和____________酶。

（3）将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共培养，筛选出含有丙种蛋白质的愈伤组织，由该愈伤组织培养成的再生植株可抵抗____________的危害。

（4）若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，则该植株的种子____________（填“含有”或“不含”）丙种蛋白质基因。

Answer

（1）基因 化学

（2）限制 DNA连接

（3）乙种昆虫

（4）不含

【解析】（1）在已知蛋白质的氨基酸序列的情况下，可根据氨基酸和碱基的对应关系，推出合成该蛋白质的mRNA序列，依据碱基互补配对原则再推出DNA的碱基序列，用DNA合成仪通过化学方法来合成目的基因．此外也可以从基因文库中获取目的基因，也可通过PCR方法获取目的基因。

（2）构建重组质粒时，需要用同种限制酶将运载体目的基因切开，并用DNA连接酶将目的基因连接到运载体上，从而构建基因表达载体。

（3）愈伤组织中含有丙蛋白，所以由愈伤组织培养的植株，乙昆虫食用后会死亡，说明植株可抵抗乙昆虫的危害。

（4）直接用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口，可在叶片部分细胞中合成丙蛋白，该植株的种子和其他的营养器官均不含有重组质粒，所以不含有丙中蛋白质的基因。

【考点定位】基因工程的应用；基因工程的原理及技术。

【名师点睛】本题考生着重从目的基因的获取和基因工程的操作工具着手解答．获得目的基因的方法：①从基因文库中获取 ②利用PCR技术扩增 ③人工合成（化学合成）；DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。