Question

某研究小组为了生产梨酿制醋酸，具体流程如图所示，请回答：

（1）图中乙过程可加入        酶，为证明该酶的效果，可分别取等量浑浊的梨汁和澄清的梨汁，各加入等量的            ，预计后者出现的沉淀物比较少。

（2）适宜条件下进行酒精发酵，发酵完毕的标志是              ，待沉淀后，可用         （方法）将上清液（即果酒）取出。若培养液酒精浓度超过        时，酵母菌会死亡。

（3）若用于醋酸发酵的醋杆菌被杂菌污染，欲消除污染的杂菌，常用方法是            。

（4）用适宜方法获得优质醋杆菌的菌种，若要扩大培养，适宜的培养基是       。

A．MS培养基

B．添加蔗糖的豆芽汁

C．含蛋白胨、酵母提取物、NaCl及其它适宜添加物的培养液

D．尿素、葡萄糖，K₂HPO4，NaCl，酚红，琼脂糖配制的培养基

（5）图表示不同醋杆菌接种量（5%、10%、15%）与醋酸发酵的关系，据图判断，下列叙述中，错误的是（     ）

A．发酵液中的醋杆菌进行需氧呼吸

B．培养时间越长，培养液的pH越低

C．接种后20h，接种量为5%的醋酸产量最少，主要是因为发酵速度较慢

D．接种后70h，接种量为15%的醋酸产量最少，与菌体生长繁殖消耗较多营养物质有关

Answer

(1)果胶 95%乙醇

(2)停止产生气泡 虹吸法 16%

(3)单菌落的分离／划线分离法／涂布分离法

(4)C

(5)B

【解析】（1）图中一过程可以用果胶酶分解果胶，有利于生产果汁。可分别取等量浑浊的梨汁和澄清的梨汁，各加入等量的95%乙醇，溶解有机物。

（2）酒精发酵，可以产生二氧化碳和酒精，因此发酵完毕的标志是停止产生气泡。待沉淀后，可用虹吸法将果酒取出，培养液酒精浓度超过16%时，酒精浓度太高，酵母菌会死亡。

（3）消除污染的杂菌，常用方法是单菌落的分离，划线分离法和涂布分离法。

（4）醋杆菌属于自养好氧菌，因此培养基中需要有机物C源、有机物N源和无机盐，要用液体培养基来培养该微生物。

（5）醋杆菌属于需要型细菌，A正确；随着培养时间的延长，醋酸含量越来越高，会抑制醋酸杆菌的活性，最终醋酸含量保持不变，培养液的pH保持不变，B错误；接种量为5%的醋酸，繁殖速度慢，因此发酵速度较慢，C正确；接种量为15%的醋酸，其发酵速度快，营养物质消耗快，因此接种后70h，接种量为15%的醋酸产量最少，D正确。

【考点定位】微生物的分离和培养