Question

基因工程技术可使大甩手杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是

A．常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒

B．导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达

C．可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒

D．DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶

Answer

D

【解析】A、构建基因表达载体时,常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒,以产生相同的黏性末端,A正确;

B、导入大肠杆菌的目的基因不一定成功表达,B正确;

C、根据重组上的标记基因,可用含抗菌素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒,C正确;

D、DNA连接酶和限制是构建重组质粒的必要的工具,D错误.

所以D选项是正确的.

【考点定位】基因工程

【名师点睛】1、基因工程技术的基本步骤:

(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.

(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.

(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.

(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术; ②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术; ③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等.

2、基因工程的工具:

(1)限制酶:能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂.

(2)DNA连接酶:连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键.

(3)运载体:常用的运载体:质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒.