Question

微生物的抗性突变是自发产生的？还是与相应的环境因素有关？有人设计下列实验，以研究探讨该问题。实验选用对链霉素敏感的大肠杆菌K12。培养基3、7、11中含有链霉素，其它培养基中不含链霉素。请据实验回答：

（1）将原始对链霉素敏感大肠杆菌K12菌种涂布在培养皿1的表面培养，接着通过右图“印章”将培养皿1中的菌群“印”在培养皿2、3上培养。“印章”位置保持不变。上述不含链霉素培养基通常使用的是    ，据功能，培养皿3是   培养基。“印章”使用前需作    处理。

（2）培养基2中的菌落是      ，培养基3中的菌落是         。

（3）培养基3的A点处有菌落生长，将培养基2中相应的A点位置的菌落上挑出少量移入培养基4中。如图反复几次实验。请根据实验现象解释“微生物的突变是自发的还是环境因素导致的”：     。培养液4、8中的菌液越来越少，但培养皿7、11中的菌落越来越多。原因是：       。

（4）要分离出单个菌落，除了本实验中的涂布法外，还可以用___________法。

（5）现有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质G，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序，于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响，结果如表所示．根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是             。

物质 突变体	培养基中加入的物质
A	B	C	D	E	G
1	-	-	-	+	-	+
2	-	+	-	+	-	+
3	-	-	-	-	-	+
4	-	+	+	+	-	+
5	+	+	+	+	-	+

（+ ：表示生长    - ：表示不生长）

Answer

（1）牛肉膏蛋白胨培养基 选择 灭菌

（2）抗链霉素大肠杆菌K12（或大肠杆菌K12）和对链霉素敏感大肠杆菌K12；抗链霉素大肠杆菌K12

（3）自发突变的；由于人为选择的作用结果

(4)划线

（5）E→A→C→B→D→G

【解析】

（1）上述不含链霉素培养基通常使用的是牛肉膏蛋白胨培养基，培养皿3选择培养基。“印章”使用前需作灭菌处理。

（2）培养基2中的菌落是大肠杆菌K12，培养基3中的菌落是抗链霉素大肠杆菌K12。

（3）因为抗链霉素菌种的获得是从没有接触过链霉素的敏感细菌中获得的，所以微生物的突变自发突变的。由于人为选择的作用结果，使得培养液4、8中的菌液越来越少，但培养皿7、11中的菌落越来越多。

（4）要分离出单个菌落，除了本实验中的涂布法外，还可以用划线法。

（5）根据题干和表格分析，培养基中加入E，5个突变体都不能生长，处于最前面；培养基中加入G，5个突变体都不能生长，处于最后面；所以这几种物质的合成顺序应是E→A→C→B→D→G。

【考点定位】考查微生物变异的相关知识