Question

下列是有关血红蛋白的提取与分离的问题，请回答：

（1）凝胶色谱法，是根据       分离蛋白质的有效方法。所用的凝胶实际上是一些       。

（2）实验前取新鲜的血液，切记要预先加入柠檬酸钠，加入柠檬酸钠的目的是        。蛋白质的提取和分离实验中，首先要用      （填写溶液名称）洗涤红细胞，其目的是去除          。

（3）在     的作用下，红细胞破裂，释放出血红蛋白。用      法可分离出血红蛋白。

（4）取血红蛋白溶液装入透析袋，再将透析袋放入pH为7．0的            中，透析12h透析的目的是       。透析的原理是                 。

（5）人们用鸡的红细胞提取DNA，用人的红细胞提取血红蛋白，其原因是           。

Answer

（1）相对分子质量大小 微小的多孔球体 （2）防止血液凝固 生理盐水 杂蛋白 （3）蒸馏水和甲苯 （高速）离心 （4）（磷酸）缓冲液 去除分子质量较小的杂质 透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内（合理得分）（5）鸡红细胞具有细胞核，含有DNA，适合用于提取DNA；人红细胞无细胞核，且血红蛋白含量丰富，适合用于提取血红蛋白（2分）

【解析】（1）凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法。所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体。相对分子质量较大的蛋白质经过凝胶颗粒的外部，移动距离短，移动速度快，先洗脱下来。

（2）柠檬酸钠可以防止血液凝固；首先要用生理盐水洗涤红细胞，其目的是去除可能吸附的血浆中的蛋白质。

（3）向红细胞中加入蒸馏水和甲苯，蒸馏水会使红细胞破裂，甲苯可以溶解细胞膜，经高速离心后可分离出血红蛋白。

（4）透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内。取血红蛋白溶液装入透析袋，再将透析袋放入pH为7．0的缓冲液中，以维持血红蛋白的结构和功能。

（5）鸡红细胞具有细胞核，含有DNA，适合用于提取DNA；人红细胞无细胞核，且血红蛋白含量丰富，适合用于提取血红蛋白。

【考点定位】本题考查血红蛋白提取实验的选材与步骤。