Question

PCR技术又称聚合酶链式反应，现在已成为分子生物学实验室的一种常规手段，它可以在体外很短的时间内将DNA大量扩增。你认为下列符合在体外进行PCR反应条件的一组是（    ）

①稳定的缓冲液环境 ②DNA模板 ③合成引物

④四种脱氧核苷酸 ⑤DNA聚合酶 ⑥DNA解旋酶 ⑦限制性核酸内切酶 ⑧温控设备

A．①②③④⑤⑥     B．①②③④⑤⑥⑦⑧

C．③④⑤⑥⑧      D．①②③④⑤⑧

Answer

D

【解析】①PCR反应的实质是模拟体内DNA复制，因此需要稳定的缓冲液环境，①正确； ②PCR反应需要DNA模板，②正确； ③PCR反应需一对引物，③正确； ④PCR反应需要以四种脱氧核苷酸为原料，④正确；⑤PCR反应需要DNA聚合酶催化延伸过程，⑤正确；⑥PCR反应过程中通过高温变性，不需要DNA解旋酶，⑥错误；⑦PCR反应不需要限制性核酸内切酶，⑦错误； ⑧PCR反应过程中需要控制的关键因素是温度，因此需要温控设备，⑧正确。

【考点定位】PCR技术的基本操作和应用

【名师点睛】PCR技术：

1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

2、原理：DNA复制。

3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。

4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。

5、过程：①高温变性：DNA解旋过程；②低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开。