Question

根据现代生物技术的相关知识，回答下列问题:

（1）我们在用苹果泥作原料探究果胶酶催化反应的最适条件和最适用量时，通过         来确定最适值的思想方法是不变的．此类实验的观测指标可以是               （两点）

（2）用葡萄制做的果酒酒味纯正，放置一段时间后，发现果酒带有明显的酸味，原因是   ．果酒发酵结束后，为方便后续使用，可将菌液转移到甘油中，与之充分混匀后，放在   ℃的冷冻箱中保存，此方法叫                 。

（3）榨取果汁的过程中，发现榨取的果汁非常浑浊．解决的方法是用果胶酶处理，果胶酶包

括                  等成份。（三种）

（4）已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、所带电荷的性质和数量情况如图所示．

①将样品装入透析袋中透析12h．若分子乙保留在袋内．则分子          也保留在袋内。

②若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子                移动速度最快。

③若将样品以2000 r/min的速度离心10min．分子戊存在于沉淀中．则分子         可能不存在于沉淀中。

（5）提取胡萝卜素常用有机溶剂萃取的方法，萃取的效率主要取决于                ，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的溫度和时间等条件的影响．将提取的胡萝卜素粗品用               法进行鉴定，鉴定过程中需用          作为对照。

Answer

（1）设置梯度；果汁的澄清度、果汁的体积；

（2）密封不严，醋酸菌进行有氧呼吸．将果酒转变成果醋 -20: 甘油管藏

（3）多聚半乳糖醛酸酶 果胶分解酶 果胶酯酶

（4）①丙和丁 ②丙 ③甲

（5）萃取剂的性质和用量； 纸层析； 胡萝卜素标准样品（标准样品也给分）

【解析】

试题分析：（1）要探究酶的最适条件和最适用量实验中的自变量应设置梯度，实验的因变量可以通过检测果汁的澄清度和果汁的体积来反应，越澄清体积越大的，说明酶活性越高。

（2）果酒变酸是因为密封不严，醋酸菌进行有氧呼吸，将果酒转变成果醋，所以产生酸味。菌液要冷冻保存需要在-20℃与甘油混合，这叫甘油管藏法。临时保存可以用斜面培养基直接接种保存。

（3）果胶酶主要包括多聚半乳糖醛酸酶 、果胶分解酶和果胶酯酶。

（4）①在透析过程中，蛋白质小的会先透析出来，如果乙留在透析袋中，根据图分析可知分子质量大的丙和丁也会留在袋内。

②若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，分子质量大的先洗脱出，故是丙。

③若将样品以2000 r/min的速度离心10min．因为离心是根据分子质量来离心的，所以当分子戊存在于沉淀中时，只有甲可能不在沉淀中。

（5）提取胡萝卜素常用有机溶剂萃取的方法，萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和用量。鉴定胡萝卜素用纸层析法，鉴定过程中需用标准样品作为对照。

考点：本题考查物质提取和分离相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。

【名师点睛】血红蛋白的提取和分离实验

（1）常用的分离方法：凝胶色谱法、凝胶电泳法等。

（2）基本原理

①凝胶色谱法：是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。

②电泳：利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度。