油菜的株高由等位基因G和g决定,GG为高杆,Gg为中杆,gg为矮杆。B基因是另一种植物的高杆基因,它与G基因在油菜的株高时有相同的效果,株高与这两个基因的数量正相关,将B基因导入油菜可培育出转基因油菜。请回答下列问题:
(1)图一表示含有目的基因的B的DNA片段和部分碱基序列,图二表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切酶,它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGC、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。若需将目的基因B导入图二中的质粒,应选择的限制酶是 ;为了筛选出含重组质粒的受体细胞,培养基上需要分别添加 。
(2)所用的质粒是双链闭合环状的DNA分子,若用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N切割,通过凝胶电泳分离分析得下表。限制酶M和N的识别序列和切割位点如图三所示。
①该质粒的长度为 kb。在该质粒中,M酶与N酶的切割位点分别有 个。
②M酶与N酶切出的能相互粘连的末端在酶的作用下相互连接,连接后的序列 (填“可以”或“不可以”)用M酶、N酶进行切割。
(3)若将一个B基因转移到矮杆油菜的染色体上,且B基因与g基因位于非同源染色体上,并在植株中得到成功表达,可观察到转基因油菜植株表现型为 。从基因工程的操作步骤上看,这属于在
水平上来鉴定检测重组性状的表达。
(4)若将一个B基因转移到中杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达,培育了甲~丁四种转基因油菜(如图四),其中与甲的株高相同的是 。
生物技术与社会现象、生产实际联系密切,请回答下列关于生物技术实践的问题。
(1)在果酒果醋的自然发酵过程中,酵母菌的来源是 ,发酵装置内加入果汁后要留出约1/3的空间,目的是 。酒精发酵后转入醋酸发酵前,除改变温度外,还需调整的发酵条件是 。
(2)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人将地衣芽孢杆菌的基因转入酵母菌中,经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种:
图一中的②、③过程需重复几次,目的是进一步 。某同学尝试过程③的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图二所示,推测该同学接种时可能的操作失误是 。
(3)制备固定化酵母细胞时要将干酵母活化,并将溶化好的 溶液冷却至室温,加入已活化的酵母细胞,进行充分搅拌,使其混合均匀,再转移至注射器中,以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的 溶液中,观察凝胶珠的形成。
(4)DNA粗提取与鉴定实验中,对最后得到絮状物进行鉴定时,先取两支试管,分别加入等量的2mol/L的NaCl溶液溶解絮状物,再向试管中各加入4mL二苯胺试剂,混合均匀,后续进一步的操作是 ,比较两支试管中溶液的颜色。
请回答下列有关实验的问题:
(1)在生物实验室里,有下列试剂供实验时选用:①质量分数为15%的溶液;②0.5g/mL的蔗糖溶液;③质量分数为0.2%的秋水仙素溶液;④0.01g/mL的龙胆紫溶液。如果要观察植物细胞的染色体形态,要选用的试剂有 (填序号)。欲使普通小麦的单倍体植株结实,可选用试剂 (填序号)处理幼苗。如果用试剂②处理紫色洋葱鳞片叶外表皮的临时装片,过一段时间后,用清水代替试剂②处理再次处理,整个过程中在高倍镜下观察到的现象是 。
(2)核辐射会诱导细胞凋亡。人白细胞介素18(IL-18)能促进免疫细胞的增殖和分化,提高机体免疫功能。某科研小组开展了“IL-18对核辐射诱导小鼠脾细胞凋亡的抑制作用“的研究:选取若干实验小鼠,随机分成三组:①组无辐射损伤;②组辐射损伤(照射,下同);③组先同量辐射损伤,1天后注射IL-18。14天后分别取各组小鼠脾细胞进行体外培养,在培养了0h、12h、24h、48h后,进行细胞凋亡检测,得到的细胞凋亡相对值如下表:
从表中数据可知,细胞凋亡相对值越小,说明发生凋亡的脾细胞数目越 ;从 (组别)两组数据可知,IL-18能抑制脾细胞凋亡。
(3)科研小组还设置了第④组实验,方法是先注射IL-18,3天后进同量辐射损伤,14天后的实验操作同前三组,与第③组相比,设置第④组的目的是 。
(4)一氧化氮与乙酰胆碱都是与学习记忆有关的神经递质,一氧化氮合成酶(NOS)能促进细胞内一氧化氮的合成。下列为某科研团队探究DHA增加学习记忆的分子机制的实验方案:
材料与试剂:食用油,添加DHA的食用油,普通饲料,若干只生理状况相同的初断乳大鼠。
实验步骤:
第一步:将初断乳大鼠随机分成4组,编号A、B、C、D。
第二步:每日经口灌喂食物,组成见表
第三步:饲养8周后,测定脑组织中乙酰胆碱酶AChE和NOS的活性,结果如下:
一氧化氮与乙酰胆碱从突触前膜释放的方式分别是 。方案中B组实验采用的食物是 。选用初断乳大鼠而不选成熟大鼠的原因是 。
血糖浓度是调节胰岛素分泌的重要因素。已知葡萄糖刺激胰岛素分泌与细胞中ATP/ADP的比率有关,在正常情况下,胰岛B细胞膜上的载体蛋白(GLUT2)转运葡萄糖进入细胞内的量与血糖浓度成正比。请回答下列问题:
(1)进入胰岛B细胞的葡萄糖经氧化反应使细胞内的ATP/ADP比率 ,导致细胞膜中的ATP敏感型钾离子通道 (填“开放”或“关闭”)使细胞膜内的电位升高,激活电压依赖性的钙离子通道,导致钙离子内流增加,触发胰岛素分子释放到细胞外。
(2)在上述过程中,如果GULT2存在缺陷,可导致胰岛B细胞对血糖的敏感性下降,刺激胰岛B细胞分泌胰岛素的最低血糖浓度将 。
(3)研究发现,高浓度葡萄糖可引起胰岛A细胞合成并分泌谷氨酸,为研究谷氨酸的作用机理,科研人员将三组数目相等且生理状况相同的小鼠离体胰岛进行培养,培养条件及结果如图一所示(CQNX为谷氨酸受体阻断剂)。实验结果表明,在高浓度葡萄糖条件下,谷氨酸能 ,且CNQX可 这一过程。由此推测,谷氨酸与胰岛B细胞表面的 结合发挥作用。
(4)科研人员进一步用谷氨酸溶液处理正常小鼠和通道基因敲除小鼠的胰岛B细胞,检测细胞内荧光强度,结果如图二所示。
①通道基因敲除小鼠与正常小鼠相比,细胞内的基础浓度显著高于正常小鼠,从胰岛素释放通路分析,是由于通道基因敲除小鼠的通道不能正常发挥作用,导致通道 。
②实验结果说明谷氨酸对胰岛B细胞的作用是通过 实现的。
甘蓝型油菜花色性状由三对等位基因控制,三对等位基因分别位于三对同源染色体上,花色表现型与基因型之间的对应关系如表。
(1)若白花(AABBDD)与黄花(aaBBDD)杂交,测交后代中出现白花的概率为 ;若黄花(aaBBDD)与金黄花杂交,自交,中黄花的基因型有 种,而黄花中能稳定遗传的占 。
(2)甘蓝型油菜花色有观赏价值,欲同时获得四种花色且金黄花的比例最低的子一代,可选择基因型为
的个体自交,子一代出现金黄花的比例为 。
(3)甘蓝型油菜的高度由两对等位基因B、b,F、f共同决定,显性基因具有增高效应,且增高效应都相同,还可以累加,即显性基因的个数与株高度呈正相关。下图是一些基因在亲本染色体上的排列情况,已知母本高60cm,父本高40cm。据此分析回答:
①的高度是 cm,测交后代中高度为45cm的植株出现的比例为 。
②多次使用结果表明,E基因存在显性纯合胚胎致死现象。如果让自交,得到的中纯合子所占比例为
。
遗传性周期性共济失调是致病基因导致细胞膜上正常钙离子通道蛋白结构异常,从而使正常钙离子通道的数量不足,造成细胞功能异常。患者发病的分子机理如图所示。请回答:
(1)图中过程①需要的酶及其作用的化学键分别是 、 ;正常基因和致病基因通过①过程得到产物的长度是一样的,但致病基因控制合成的异常多肽链较正常多肽链短,致病基因的形成是因正常基因发生了 方式的突变。观察分子机理图示可知,遗传性周期性共济失调的致病基因控制性状的方式是 。
(2)如果细胞的核仁被破坏,会直接影响图中 (填结构名称)的形成。
(3)在研究遗传性周期性共济失调发病分子机理的过程中,科学家用人工合成的mRNA为模板进行细胞外蛋白质合成实验。若以ACACACACAC……为mRNA,则合成苏氨酸或组氨酸的多聚体;若以CAACAACAACAA……为mRNA,则合成谷氨酰胺、天冬酰胺或苏氨酸的三种多聚体。据此推测苏氨酸的密码子的 。
(4)假定该致病基因由5000个碱基对组成,其中一条链上四种含氮碱基A:T:G:C的比例是1:2:3:4,整个基因中的四种含氮碱基A:T:G:C的比例是 ;因医学研究需要,将该致病基因连续进行了6此复制,其中,在第6次复制时需要 个鸟嘌呤脱氧核苷酸。