Question

长期以来，香蕉生产遭受病害的严重威胁，制约了其发展。目前，随着转基因抗病香蕉基因工程技术的日趋成熟，为培育抗病香蕉品种开辟了新途径。转基因抗病香蕉的培育过程如图所示，质粒上有Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I等四种限制酶切割位点。请回答：

（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶___________，对含病毒基因的DNA和质粒，进行切割：能死抗，A中能使抗病毒基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是___________，其中培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导人抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有___________，作为标记基因。

（2） 目的基因能在香蕉细胞中稳定遗传的关键是___________；香蕉组织块经过①②获得转基因抗病植株，其依据的原理是___________。

（3） 香蕉具有不耐储存的特点，科学家把控制香蕉成熟的基因导入香蕉，获得转基因延熟香蕉，储存时间可以延长两个周。在延熟过程中，R蛋白起着很关键的作用。如果用蛋白质工程来生产R蛋白，应从预期的蛋白质的功能出发来设计___________，再推测应有的氨基酸序列。

（4）科学家把得到的抗病香蕉和耐储存的香蕉做成了人工种子，人工种子就是以植物组织培养得到的___________等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子，在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。

Answer

（1）PstⅠ、EcoRⅠ 启动子、终止子 抗卡那霉素基因

（2）转基因香蕉的DNA上是否插入了目的基因 植物细胞的全能性

（3）预期的蛋白质结构

（4）胚状体、不定芽、顶芽和腋芽

【解析】

（1）目的基因在受体细胞中表达，需要在前面接上启动子，是RNA聚合酶的结合位点，起始转录，在后面街上终止子，终止翻译．需要用的抗生素抗性基因做标记基因．

（2）目的基因能在香蕉细胞中稳定遗传的关键是转基因香蕉的植物细胞的全能性。

（3）蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质的结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列．

（4）人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽、腋芽为材料．

【考点定位】 基因工程的原理及技术；植物培养的条件及过程

【名师点睛】根据题意和图示分析可知：含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点，其中SmaⅠ酶的切割位点位于抗病基因（目的基因）上；质粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位点．所以要活动重组质粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ进行切割．

图中①表示脱分化过程、②表示再分化过程．