Question

大砀杆菌有许多菌株，野生型菌株在普通培养基中就能成活，菌株A:me^-bio^-thr⁺leu⁺thi⁺需要在基本培养基中补充甲硫氨酸、生物素，菌株B:met⁺bio⁺thr^-leu^-thi^—需要在基本培养基中补充苏氨酸、亮氨酸和硫胺。科学家Lederberg和Tatum曾做了如下实验，回答下列问题；

（1）如上图所示，菌株A和B混合培养几小时后，把大肠杆菌洗涤后涂布在基本培养基的固体平板上，发现长出了若干野生型菌落，对此实验现象可作出如下假设：

①不同大肠杆菌间物质发生重组。

②                   。

（2）为了探究上述假设①，有人设计了一种U型管（如右图），中间用过滤器隔开，大肠杆菌不能通过，但培养液和营养物质可通过，实验如下。请补充相关实验内容：

实验步骤：

①在U型管中加入               ；

②U型管两端各加入菌株A、菌株B,培养几小时；

③将U型管两端的大肠杆菌各自取出洗涤后涂布在             上，观察有无菌落。

实验结果：              。

实验结论：菌株A与菌株B之间遗传物质发生重组。

（3）现有1升水样，用无菌吸管吸取1mL转至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释至10³倍。各取0．1mL稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为31、34、37，则每升原水样中大肠杆菌数为          。该数据理论上比细菌实际数目             。

（4）该实验中需要灭菌的是            。（至少写3个）

Answer

（1）②大肠杆菌发生了基因突变

（2）①液体基本培养基（基本培养液） ③基本培养基 没有菌落产生

（3）3．4×108 个（2分） 少

（4）培养基、培养皿、试管、吸管、U形管、过滤器等

【解析】

试题分析：（1）在普通培养基上，菌株A和B单独培养不能存活，而混合培养几小时后，在培养基上出现了野生型菌落，可能是不同大肠杆菌间物质发生了重组，也可能是大肠杆菌发生了基因突变。

（2）实验步骤：①在U型管中加入体基本培养基；②U型管两端各加入菌株A、菌株B,培养几小时；③将U型管两端的大肠杆菌各自取出洗涤后涂布在基本培养基上，观察有无菌落。

实验结果是没有菌落产生。

实验结论是菌株A与菌株B之间遗传物质发生重组。

（3）每升原水样中大肠杆菌数=（31+34+37）÷3÷0．1×103÷10-3=3．4×108 个。由于培养基中细菌会相互重叠，所以观察到的菌数比实际菌数少。

（4）实验中培养基、培养皿、试管、吸管、U形管、过滤器等都需要严格灭菌。

考点：本题考查微生物培养与分离的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。