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GDNF是一种神经营养因子.对损伤的神经细胞具有营养和保护作用.研究人员构建了含...

GDNF是一种神经营养因子.对损伤的神经细胞具有营养和保护作用.研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究.请回答:

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(1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中,使用胰蛋白酶的目的是     

(2)构建含GDNF基因的表达载体时,需选择图1中的      限制酶进行酶切.

(3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示).为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析,结果如图2所示.图中第      泳道显示所鉴定的载体是正向连接的.

(4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后,为了检测GDNF基因是否成功表达,可用相应的      与提取的蛋白质杂交.当培养的神经干细胞达到一定的密度时,需进行      培养以得到更多数量的细胞,用于神经干细胞移植治疗实验.

 

(1)使细胞分散开 (2)XhoⅠ (3)② (4)抗体 传代 【解析】 试题分析:(1)动物细胞培养时,可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶作用,使细胞分散开. (2)质粒上有XhoⅠ识别位点,而且在启动子之后,所以选用XhoⅠ限制酶进行酶切. (3)泳道①仅有一种条带,属于载体自连;泳道②有两种条带,且长度分别与质粒和GDNF基因长度相同,为正向连接;泳道③有两种条带,长度与BamHⅠ酶切后结果相同,为反向连接. (4)检测基因是否表达采用抗原抗体杂交法.培养动物细胞采用动物细胞培养法,当细胞密度达到一定程度,需要进行分瓶,进行传代培养. 故答案为:(1)使细胞分散开 (2)XhoⅠ (3)② (4)抗体 传代  
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考点分析:
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回答下列关于生命活动调节的问题:

(1)内环境的稳态是高等动物的生命活动的基础和保障,稳态的实现必须      依靠调节网络.体温调节中枢位于      ,它还能传导兴奋与分泌激素.

(2)高等动物下丘脑能通过传出神经直接调节甲状腺的活动,此时相应的神经冲动在神经纤维上以      形式传导到甲状腺,此反射弧中的效应器由      组成.

(3)血糖的平衡对于保证机体各种组织和器官的能量供应具有重要的意义,胰岛素是维持血糖平衡的重要激素.如图表示胰岛素分泌的调节过程及胰岛素作用机理.

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请分析回答:

①当血糖浓度上升时,葡萄糖感受器接受刺激产生兴奋,最终由传出神经末梢释放      ,与胰岛B细胞膜上相应的受体结合,引起胰岛素分泌增多;由图可知,胰岛B细胞分泌胰岛素还会受到      的影响.

②据图分析,胰岛素与组织细胞膜上的受体结合后,一方面增加细胞内葡萄糖转运蛋白的合成,促进  进入细胞;另一方面促进细胞内      的合成,从而降低血糖浓度.

③糖尿病病因之一是患者血液中存在异常抗体(图中抗体1、抗体2),这些抗体致病的原因是由于它们能与某些细胞细胞膜表面的受体结合,而导致血糖调节异常.从免疫学角度分析,这两种异常抗体引起的糖尿病在免疫学上都属于      病.若患者体内只存在异常抗体2,则患者体内的胰岛素浓度将      (大于、等于或小于)正常人体内的胰岛素浓度.

 

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我国科学家屠呦呦及其团队从青蒿中分离出青蒿素用于疟疾的治疗,这一措施至今挽救了全球数百万人的生命.青蒿中青蒿素的含量很低,科研工作者一直致力于提高青蒿素含量的研究.某研究小组给青蒿转入青蒿素合成的关键基因fps,通过该基因的过量表达来提高青蒿素的产量.请回答相关问题.

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(1)提取青蒿的总RNA,在      酶作用下获得青蒿的cDNA.

(2)根据基因fps的编码序列设计      ,通过      得到目的基因,然后构建含有fps基因的表达载体.为了便于筛选,表达载体中应含有     

(3)将表达载体导入农杆菌细胞中,用此农杆菌侵染无菌青蒿苗叶片,培养侵染后的叶片获得幼苗.培养过程中细胞发生的主要变化是           

(4)将获得的22株生长健壮的转基因青蒿苗移栽到大田里,待其生长到现蕾期后收获植株地上部分,测定青蒿素的含量,得到的结果如图所示:

测定结果显示,转基因青蒿植株中青蒿素含量最多约是对照组的      倍.不同植株中青蒿素的含量      ,这可能是由于T﹣DNA整合到青蒿基因组的不同位置,使外源基因的      引起的.

 

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图为科学家在某一生态系统中开展了轻度、中度、重度入侵区的群落植物多样性调查(结果如图1).同时对轻度入侵区的能量流动进行了研究(结果如图2).

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(1)群落中物种数目的多少称为      ,其随入侵程度的增加而      .重度入侵区植物物种数变化较小的原因是      .调查说明外来物种的入侵能改变群落演替的     

(2)该入侵物种能分泌化学物质抑制其它植物生长发育,同时能引起昆虫和动物拒食.入侵物种与本地植物之间构成      关系,信息传递能够调节生物的     

(3)研究发现,经济植物黑麦草能抑制该入侵物种的生长.为了解其抑制机制,进行如下实验:

①用完全营养液培养黑麦草幼苗;

②取一定量培养过黑麦草的营养液加入用于培养该入侵物种幼苗的完全营养液中作为实验组,对照组加入等量的该入侵物种幼苗的完全营养液.

③在适宜条件下培养一段时间,观察并比较两组入侵物种幼苗的长势.

该实验的目的是探究     

(4)在研究能量流动时,可通过      调查初级消费者田鼠种群密度.初级消费者到次级消费者的能量传递效率是     

 

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下列有关生态系统的叙述,错误的是(  )

A.生态系统的组成成分中含有非生物成分

B.生态系统相对稳定时无能量输入和散失

C.生态系统持续相对稳定离不开信息传递

D.负反馈调节有利于生态系统保持相对稳定

 

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如图为某人工鱼塘食物网及其能量传递示意图(图中数字数值,单位是J•m﹣2•a﹣2),下列叙述正确的是(  )

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A.该食物网中最高营养级为第六营养级

B.该食物网中第一到第二营养级的能量传递效率为25%

C.太阳鱼呼吸作用消耗的能量为1357J•m﹣2•a﹣1

D.该食物网中的生物与无机环境共同构成一个生态系统

 

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