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一位科学家正在使用氨苄青霉素敏感型菌株进行研究,该菌株不能利用乳酸,这是因为它的...

一位科学家正在使用氨苄青霉素敏感型菌株进行研究,该菌株不能利用乳酸,这是因为它的乳糖操纵基因异常。该科学家有两种质粒,一种含有正常的乳糖操纵基因,另一种含有氨苄青霉素抗性基因。她运用限制酶和DNA连接酶,获得了一些含有这两个基因的重组质粒。然后在一个仅以葡萄糖为唯一能源的培养基中培养该细菌,并向其中加入高浓度的重组质粒。使细菌增殖。再将实验组细菌含重组质粒和对照组细菌不含重组质粒放入下表所示环境中让其生长。请回答下列问题:

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1在基因工程的基本操作程序中,___________是基因工程的核心。限制酶是基因工程中常用的工具,若要提取限制酶,可选择的生物是__________举出一例。本实验中使用限制酶的作用是:__________。

2在以葡萄糖为唯一能源的培养基中加入高浓度的质粒,为了促进细菌更好的吸收重组质粒,还应用______处理细菌,使细菌处于_______。该培养基以葡萄糖为能源是因为_________。

3若没有新的突变发生,细菌最有可能在哪些培养基上生长出菌落   

A只有1,2和4号      B只有3,5和6号

C只有1,2,3和4号   D只有4,5和6号

4如果在准备制作重组质粒时未使用DNA连接酶,则细菌最可能在________号和_______号平板上长出菌落。

5若该科学家用该培养基进行另一项实验如表2,在该培养基中用乳糖为唯一能源,则细菌能在哪一培养基中长出菌落_____________。

A只有10号     B只有8号      C7和8号       D8号和10号

 

(1)基因表达载体的构建(1分) 大肠杆菌(答出的生物属于原核生物即可给分,只答原核生物不给分) (1分) 在质粒DNA上进行切割(合理即可) (1分) (2)Ca2+(1分) 感受态 (1分) 葡萄糖是单糖,可被细菌吸收,确保细菌均能在此培养基中正常生长 (合理即可) (3)C (4)1 4 (5)C 【解析】 (1)在基因工程的基本操作程序中,基因表达载体的构建是基因工程的核心。限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的,若要提取限制酶,可选择的生物是大肠杆菌等原核生物。依题意可知,本实验中使用限制酶的作用是:在质粒DNA上进行切割。 (2)为了促进细菌更好的吸收重组质粒,应用Ca2+处理细菌,使其处于感受态。葡萄糖是单糖,可被细菌吸收,确保细菌均能在此培养基中正常生长,所以该培养基以葡萄糖为能源。 (3)含重组质粒的菌株,因含有氨苄青霉素抗性基因,可以在葡萄糖培养基(1号)、葡萄糖和氨苄青霉素培养基(2号),以及葡萄糖、乳糖和氨苄青霉素培养基(3号)上生长;而不含重组质粒的菌株,由于不含氨苄青霉素抗性基因,所以只能在葡萄糖培养基上生长(4号),不能在葡萄糖和氨苄青霉素培养基(5号),以及葡萄糖、乳糖和氨苄青霉素培养基(6号)上生长。综上分析,C项正确,A、B、D三项均错误。 (4) 如果在准备制作重组质粒时未使用DNA连接酶,则质粒不能在细菌细胞中正常复制和表达,细菌最可能在1号和4号平板上长出菌落。 (5) 若在该培养基中用乳糖为唯一能源,则含有重组质粒的细菌能利用乳糖,并能抗氨苄青霉素;但未导入重组质粒的细菌则不能利用乳糖,对氨苄青霉素没有抗性,所以细菌能在7号和8号培养基中长出菌落。综上分析,C项正确,A、B、D三项均错误。 【考点定位】基因工程。 【名师点睛】本题以图文结合的形式,综合考查学生对基因工程等知识的识记和理解能力。正确解答此类问题,需要平时在学习的过程中,要多注意对相关的知识点进行归纳、总结,以便强化记忆、形成清晰的知识网络。  
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