Question

常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差。科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母。

（1）酿酒酵母代谢类型是        无氧呼吸的反应式为                      

（2）将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，然后将瓶中的液体用        法接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养，获得各种菌落。在葡萄酒酿造过程中，葡萄也需要冲洗，其主要目的是                。

（3）将培养基上的酵母菌菌株转接到        的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。从存活的酵母菌中提取DNA，经PCR技术获得目的基因，PCR技术获得同一种目的基因的原理是                        。

（4）将目的基因连接到质粒上，该质粒具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因。将重组质粒导入酵母菌时，应选择缺乏        能力的酿酒酵母作为受体菌。

（5）将上述获得的转基因酿酒酵母接种在以葡萄糖和木糖为碳源的培养基中进行发酵能力测试。随着发酵的持续进行，若该酿酒酵母能够存活，说明它能                ，即说明所需菌株培育成功。

Answer

（1）异养、兼性厌氧型 C6H12O6→2C2H50H+2C02+能量

（2）稀释涂布平板（平板划线）洗去浮尘和杂菌

（3）以木糖为唯一碳源 DNA半保留复制

（4）尿嘧啶合成

（5）利用葡萄糖和木糖产生酒精，且对酒精的耐受能力强

【解析】

试题分析：（1）酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型，无氧呼吸反应式是C6H12O6→2C2H50H+2C02+能量。

（2）液体要接种到培养基上只能用稀释涂布平板法。在酿酒过程中葡萄也需要冲洗的目的是洗去浮尘和杂菌，但应先冲洗再除去枝梗。

（3）因为题后说不能利用木糖，所以应是接种到以木糖为唯一碳源的培养基中，PCR扩增的原理是DNA的双链复制。

（4）因为该质粒具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因，标记基因起到的是筛选作用，所以应选择缺乏尿嘧啶合成能力的酵母菌作为受体菌。能繁殖的就是所需要的。

（5）酵母菌开始消耗的葡萄糖，如果发酵继续进行，该酵母菌还能存活，说明它能够利用葡萄糖和木糖产生酒精，且对酒精的耐受能力强，说明培育成功。

考点：本题考查生物技术实践相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握程度。