Question

利用纤维素酶降解秸秆，条件温和且无污染．研究人员从农田中采集土样，筛选出分泌纤维素酶的菌株，并研究其产酶条件．

（1）纤维素分解菌从生态系统的成分分析，应该属于      ．

（2）用      的培养基可筛选出纤维素分解菌．若将菌液涂布在培养基培养后，发现菌落密集、连成一片，说明菌液浓度过      ，此时需要      ，才能获得单菌落．

（3）用刚果红染色法进一步筛选分解纤维素能力强的菌株，下图中透明圈产生的原因是      ，图中最适合作为目标菌株的是      ．

（4）得到纯化菌株后又进行多组实验，流程如下：

该实验的目的是      ，若以滤纸为底物进行实验，实验结果的酶活力可以表示为      ．为进一步提高菌株产酶能力，还可以探究      等其他因素的影响．

Answer

（1）分解者

（2）以纤维素作为唯一碳源 大 （用无菌水）稀释

（3）菌落周围的纤维素被分解 菌4

（4）探究培养液初始pH对纤维素分解菌产酶能力的影响（或探究培养液初始pH对纤维素酶活力的影响）

单位时间内滤纸的分解量（或单位时间内葡萄糖的生成量） 接种量（或培养时间、碳源、氮源、培养温度、营养条件等）

【解析】

试题分析：微生物培养的关键是无菌操作．微生物培养过程中除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件，需对培养基和培养皿进行消毒．可以通过稀释涂布平板法或显微镜计数法进行统计计数．

刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌．刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入，也可以在菌落形成后加入．若在细菌菌落形成前倒平板时加入刚果红，则所加刚果红要进行灭菌，以防杂菌的侵入，影响纤维素分解菌菌落的形成；若在菌落形成后加入刚果红，则不需要灭菌．

【解析】
（1）纤维素分解菌在生态系统中充当的是分解者．

（2）分离纤维素分解菌要从富含纤维素的环境中寻找，以纤维素为唯一碳源的培养基上进行选择，就可以分离到纤维素分解菌．纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高（土壤溶液稀释不够）．此时需要（用无菌水）稀释，才能获得单菌落．

（3）在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落，图中透明圈产生的原因是：刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，降解圈大小与纤维素酶的多少和活性有关．纤维素酶的量越多，活性越强，分解的纤维素越多，透明降解圈越大，所以图中降解纤维素能力最强的菌株是4．

（4）分析流程图可知，该实验的自变量是PH值，因变量是纤维素酶的活力，故该实验的目的是：探究培养液初始pH对纤维素分解菌产酶能力的影响，若以滤纸为底物测定，酶活力可以表示为单位时间内滤纸的分解量（或单位时间内葡萄糖的生成量），为进一步提高菌株产酶能力，还可以探究接种量、培养时间（或碳源、氮源、培养温度、营养条件等）等其他因素的影响．

故答案为：

（1）分解者

（2）以纤维素作为唯一碳源 大 （用无菌水）稀释

（3）菌落周围的纤维素被分解 菌4

（4）探究培养液初始pH对纤维素分解菌产酶能力的影响（或探究培养液初始pH对纤维素酶活力的影响）

单位时间内滤纸的分解量（或单位时间内葡萄糖的生成量） 接种量（或培养时间、碳源、氮源、培养温度、营养条件等）

考点：微生物的分离和培养．