Question

2015年与我国女科学家屠呦呦平分诺贝尔生理学与医学奖的是爱尔兰科学家威廉一坎贝尔和日本药物科学博士聪大村，他们二人的贡献是发现了一种新的药物，名为阿维茵素，其衍生产品降低了河盲症和淋巴丝虫病的发病率，同时还能有效对抗其他寄生虫病，治疗效果显著。聪大村从土壤样品中分离链霉菌的新菌株，在实验室内通过成千上万链霉菌培养物筛选出一些较有发展前途的菌株，这就是阿维菌素的来源。

（1）制备链霉菌培养基时，在各成分都溶化后和分装前，要进行的是___________________和灭菌，对培养基进行灭菌的常用方法是______________________。倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是_______________________________。

（2）图①是在纯化过程中通过___________________法分离培养的结果，在培养基上接种时接种环需通过灼烧灭菌，完成图中划线操作，共需要灼烧接种环________________次。图②表示的是用_____________________法接种培养后得到的结果。

（3）在纯化过程中，在固体培养基上划线分离时，经培养，在划线的末端出现_______表明菌已分离。在此过程中，正确的操作是___________。

A．每次时，接种环都需要蘸菌液一次

B．划线分离时，需要把接种环深入到培养基中进行接种

C．在超净平台中进行接种时，不能关闭过滤风

D．划线时要将最旨一区的划线与第一区的划线相连

Answer

（1）调整pH 高压蒸汽灭菌 防止培养皿盖上的泠凝水落入培养基造成污染

（2）平板划线（1分） 4 稀释涂布平板

（3）不连续单个菌落 C

【解析】

（1）制备培养基时，要先调整pH和灭菌，培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌。倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，防止培养皿盖上的泠凝水落入培养基造成污染。

（2）图是在纯化过程中，用了平板划线法接种和分离微生物的方法。划线之前要灼烧灭菌，每次划线后也要灼烧灭菌，该图划线3次，因此共需要灼烧接种环4次。图培养皿中，菌落比较分散，用了稀释涂布平板接种的。

（3）接种环在第一次划线时需蘸一次菌液，其余则从上次划线末端开始划线，A错误；深入到培养基中进行接种，会造成杂菌污染，B错误；不能关闭过滤风，防止杂菌污染，C正确；划线是将每次划线的末端开始划，D错误。

【考点定位】微生物的培养和利用

【名师点睛】平板划线的操作的基本步骤是：

1、右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞。

2、左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。

3、烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。

4、将平板倒置，放入培养箱中培养。