Question

育种工作者从高粱的基因组中分离出磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因（Ppc基因），利用农杆菌介导的转化系统将其转入水稻体内，以提高水稻的光合效率。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoR Ⅰ、Apa Ⅰ四种限制酶切割位点。请回答下列相关问题：

（1）基因工程的核心步骤是            ；构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶           分别对含Ppc基因的DNA和质粒进行切割，再用       使其连接。构建的表达载体A除含有目的基因、标记基因外，还应有                 。

（2）欲在体外获得大量的Pc基因，常采用          技术，其中所用的酶的特点是          。

（3）水稻组织细胞具有              ，因此，可以利用            技术将导入Ppc基因的水稻组织细胞培养成植株。

Answer

（1）基因表达载体的构建 PstI、EcoR I DNA连接酶 启动子、终止子

（2）PCR 耐高温（具有热稳定性）

（3）全能性 植物组织培养

【解析】（1）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，根据含Ppc基因的DNA上限制酶的切割位点可知，应选用PstI、EcoR I分别对含Ppc基因的DNA和质粒进行切割，再用DNA连接酶将其连接。（2）欲在体外获得大量的Ppc基因，常采用PCR技术，利用到的Taq酶具有耐高温的特点。（3）植物细胞具有全能性，可采用植物组织培养技术将组织细胞培育成植株。