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【现代生物科技专题】人组织纤溶酶原激活物htPA是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下:

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1htPA基因与载体用_________切割后,通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用_________技术。

2为获取更多的卵细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其__________。采集的精子需要经过__________,才具备受精能力。

3将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行__________。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的__________。

4若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到__________,说明目的基因成功表达。

 

(1)同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶);DNA分子杂交(或核酸探针) (2)超数排卵; 获能(处理) (3)显微注射法; 性别鉴定; 全能性 (4)htPA(或人组织纤溶酶原激活物) 【解析】(1)htPA基因与载体需要用同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶)切割,形成相同的黏性末端,然后再通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体.检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用DNA分子杂交(或核酸探针)技术,原理是碱基互补配对。 (2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其超数排卵。采集的精子需要经过获能,才具备受精能力。 (3)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其超数排卵.采集的精子需要经过获能(处理),才具备受精能力.利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的全能性。 (4)基因表达成功时可获得目的基因的产物,既在转htPA基因母羊的羊乳中检测到htPA(或人组织纤溶酶原激活物),说明目的基因成功表达。 【考点定位】基因工程的原理及技术 【名师点睛】知识拓展:DNA重组技术至少需要三种工具:限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体。目的基因分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。  
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【生物—选修 生物技术实践】有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。

1微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是__________。

2与微生物培养基相比,植物组织培养的培养基常需添加生长素和_______,这些植物激素一般需要事先单独配置成_________保存备用。

3纯化菌株时,通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域的第一条线上无菌落,其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________。

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4为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是________,该实验设计是否合理?为什么?_______。

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某二倍体植物的花色由位于三对同源染色体上的三对等位基因Aa、Bb、Dd控制,研究发现体细胞中的d基因数多于D基因时,D基因不能表达,且A基因对B基因表达有抑制作用如图甲某黄色突变体细胞基因型与其可能的染色体组成如图乙所示其他染色体与基因均正常,产生的各种配子正常存活

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1根据图甲,正常情况下,橙红花性状的基因型有        种。两基因型不同的纯合白花植株杂交,若F1表现型全开白花,F2植株有27种基因型,亲本的组合有     不考虑正反交

2正常情况下,图甲一黄花植株与一橙花植株杂交,若子代有白花植株出现,则黄花植株出现的概率应为              

3图乙中,②、③的变异类型分别是                     ;基因型为aaBbDdd的突变体花色为           

4为了确定aaBbDdd植株属于图乙中的哪一种突变体,设计以下实验。

实验步骤:让该突变体与基因型为aaBBDD的植株杂交,观察并统计子代的表现型与比例结果预测:

Ⅰ若子代中                     ,则其为突变体①;

Ⅱ若子代中                     ,则其为突变体②;

Ⅲ若子代中                     ,则其为突变体③。

 

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为了从甲、乙、丙三种微生物获取高性能碱性淀粉酶,兴趣小组的同学在科研人员的帮助下,从上述三种微生物提取了淀粉酶提取液提取液中酶浓度相同,进行了如下实验。实验步骤如下:

1取四支试管,分别编号。

2按下表要求完成操作。并在表中各列的字母位置,填写相应试剂的体积量mL

 

试管1

试管2

试管3

试管4

蒸馏水

2

2

2

A

pH=8缓冲液

05

05

05

05

淀粉溶液

1

1

1

1

甲生物提取液

03

 

 

 

乙生物提取液

 

03

 

 

丙生物提取液

 

 

03

 

总体积

38

38

38

B

3将上述四支试管放入37℃的水浴,保温1小时。

4取出上述四支试管,冷却后滴入碘液。

5观察比较各支试管溶液颜色及其深浅。

[实验结果]“+”表示颜色变化的深浅,“—”表示不变色

 

试管1

试管2

试管3

试管4

颜色深浅程度

++

+

C

请回答下列问题:

1填写表中的数值:A为______,C的颜色深浅程度为_____用“+”或“-”表示。该实验作为实验组的试管是      ,设置对照实验的目的是__________。

2该实验的自变量是______________,无关变量有_______________至少写出2种

3除了用碘液检验淀粉的剩余量来判断实验结果外,还可以用_____________试剂来检测生成物。若用该试剂检验,还需要对试管_______________处理,才能据颜色变化深浅判断出实验结果。

4根据上述结果得出的实验结论是:不同来源的淀粉酶,虽然酶浓度相同,但活性不同。你认为造成实验中三种酶活性差异的根本原因是_________________。

 

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水体氮、磷富营养化常引起藻类大量繁殖,出现“水华”、“赤潮”或“绿潮”现请回答下列问题:

1“水华”主要是蓝藻,“赤潮”主要是甲藻和硅藻,“绿潮”主要是绿藻,这些藻类在细胞结构上最主要的区别是          。藻类细胞以          方式吸收NO3-、PO43-

2某沿海地区连续7年爆发大规模的浒苔大型绿藻,某科研小组对浒苔进行了研究,结果如下:

表:不同光照水平下浒苔的浮沉状况

烧杯编号

1

2

3

4

光照强度lx

0

70

270

470

浒苔沉浮状况

沉入烧杯底部

沉入烧杯底部

悬于水中

浮于水面

曲线:浒苔光照强度与O2吸收、释放量的关系

验前需要对浒苔进行抽气处理,目的是          ;浒苔的沉浮状况,与细胞的         生理活动有关。

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②表中3、4号烧杯的光照强度,与上图中的          段对应。

③实验结果表明,当日照强度弱时的明显危害是,水体中          浓度会明显降低。

 

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图1表示细胞分裂和受精作用过程中核DNA含量和染色体数目的变化。图2是某一生物体中不同细胞的分裂示意图,据图回答下列问题。

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1图1中AC段和FG段形成的原因是_________,L点→M点表示________过程。

2图2中的B图为_____________细胞,发生在图1中的______________段。

3基因的分离和自由组合发生于图1中的_________________段。

4图一中与GH段和OP段相对应的细胞中,染色体有何不同                

 

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