Question

生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。

（1）用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用_____________、_____________方法从油料作物中提取。

（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供_____________，培养基灭菌采用的最适方法是_________________________法。

（3）测定培养液中微生物数量，可选用________________法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测_____________，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用________________技术使脂肪酶能够重复使用。

（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_________________技术。

Answer

（1）压榨 萃取 （注：两空顺序无先后）

（2）碳源 高压蒸汽灭菌

（3）显微镜直接计数 酶活性（或：酶活力） 固定化酶（或：固定化细胞）

（4）PCR（或：多聚酶链式反应，聚合酶链式反应）

【解析】

试题分析：

（1）由于生产生物柴油的植物油不易挥发，因此可选用压榨和萃取方法从油料作物中提取。

（2）植物油由C、H、O三种元素构成，可为微生物提供碳源。培养基最适合用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。

（3）测定培养液的微生物数量，宜选用显微镜计数法直接计数。分离出的脂肪酶要对酶的活性进行检测，以确定其实用价值。可利用固定化酶（或固定化细胞）技术使脂肪酶得到重复使用。

（4）通常采用PCR技术扩增目的基因（克隆目的基因）。

考点：本题考查植物有效成分的提取、微生物的培养与应用、固定化酶技术、基因工程的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。