(7分)运用动物体细胞杂交技术可实现基因定位。研究发现:用人的细胞与小鼠体细胞进行杂交得到的杂种细胞含有双方的染色体。杂种细胞在持续分裂过程中仅保留鼠的染色体而人类染色体则逐渐丢失,只剩一条或几条。右图是人的缺乏 HGPRT 酶突变细胞株( HGPRT - )和小鼠的缺乏 TK 酶细胞株( TK-)融合后并在 HAT 培养液中培养的过程,结果表明最终人的染色体在融合细胞中仅存有 3 号染色体或 17 号染色体或两者都有。已知只有同时具有 HGPRT 酶和 TK 酶的融合细胞才可在 HAT 培养液中长期存活与繁殖。
(1)体细胞杂交的优点是 ,过程 ① 常用的生物方法是 。
(2)过程 ② 中,需还要定期用 处理细胞,使贴壁生长的细胞脱落形成细胞悬液。
(3)从培养过程看, HAT 培养液不仅能提供养料,还起 作用。
(4)从图示结果看,可以确定人的 基因位于 号染体;该方法可以对鼠基因定位吗?_______________
(9分)降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA,过程如下图。
在此过程中发现,合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题:
(1)Klenow酶是一种_____酶,它能催化相邻核苷酸的________和_______之间形成_______键;合成的双链DNA中有________个碱基对。
(2)获得的双链DNA经EcoRⅠ(识别序列和切割位点-G↓AATTC-)和BamHⅠ(识别序列和切割位点-G↓GATCC-)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中,筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
①大肠杆菌是理想的受体细胞,这是因为它____________________________________。
②设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是_______________________________________。
(3)经DNA测序表明,最初获得的多个重组质粒,均未发现完全正确的基因序列,最可能的原因是_________。
(4)上述制备该新型降钙素,运用的现代生物工程技术是____________________。
(6分)下图表示利用胚胎干细胞(ES细胞)所作的一系列研究,请据图分析回答:
(1)过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胚胎成纤维细胞的饲养层上,并加入动物血清、抗生素等物质,维持细胞不分化的状态。在此过程中,饲养层提供干细胞增殖所需的___________,加入抗生素是为了____________________,这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。
(2)过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔,通过组织化学染色,用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素,这项研究利用了胚胎干细胞具有______________的特点。在哺乳动物早期发育过程中,囊胚的后一个阶段是_________。
(3)过程Ⅲ中目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是____________________,将目的基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体,其目的是___________________________________________。
(8分)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1)一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后,含有 个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越_____,原因是 。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用Srna Ⅰ切割,原因是 。
(4)与只使用EcoR I相比较,使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入 酶。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
(6)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在 的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。
(7分)细胞是多种化学元素和化合物构成的生命系统。在生物体内,某些重要化合物的元素组成和功能关系如下图所示,其中A、B、C、D、E分别表示生物体内的大分子物质。请据图回答下列有关问题:
(1)单体a代表_____;试用几何图形表示单体c或d:_______;单体e的结构通式是______________。
(2)已知物质C和E紧密结合构成了细胞核中的重要结构,该结构名称的由来是______________。
(3)细胞膜上分布有物质A和E相结合形成的物质,该物质在细胞膜上具有______的功能,即在细胞间信息传递中起重要作用,试根据所学知识举一属于细胞间通过细胞膜直接传递信息的实例:________。
(4)物质B与A比较,分子中有较少的O而C、H的含量较高,这种特点使之适应于_________的功能。
(6分)如图所示为高等动物细胞及细胞膜的亚显微结构模式图(局部),请据图回答:
(1)图中能发生碱基互补配对的细胞器是 (填数字)。
(2)细胞识别与图中的化学成分 (填字母)有关。
(3)若图为人的浆细胞,与其他没有分泌功能的细胞相比较,结构发达的细胞器是[ ] ,细胞的这一功能体现了细胞膜的 。
(4)若用甲基绿、吡罗红染色剂对图中细胞染色,在显微镜下看到的现象是 。
(5)一种嗅觉细胞只拥有一种类型的气味受体,根本原因是 。