Question

（12分）为了探究苦马豆素（SW）对肝癌细胞体外生长的作用，研究员做了以下实验：

材料与用具：小鼠肝癌组织、SW、rpmi-1640培养液（用于培养癌细胞）、生理盐水、活细胞检测仪、培养皿等（说明：对动物细胞的培养过程和检测方法不做具体要求）

（1）完善实验步骤：

①配制细胞悬液：用胰蛋白酶将小鼠肝癌组织消化成单个细胞，加入________________配制成单细胞悬液，随机均分为若干组，并各组测定初始细胞数；

②实验分组：                                            ；

③培养：以上各级置于37^oC、5％的二氧化碳培养箱中分别培养；

④检测与处理：分别在24h、48h、72 h时取样检测各组存活的细胞数，求细胞存活率(细胞存活率=实验组/对照组×l00％)。请分析回答：

（2）请你设计一张表格，用以记录和处理实验数据。

（3）下图表示本实验结果的坐标曲线图，据图你能得出结论是___________。

Answer

（1）①rpmi-1640培养液（2分） ②在1-6组中依次加入等量且适量不同浓度的SW溶液（浓度分别为0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0μg/mL，第7组加入等量的生理盐水作为对照。（2分） （2）探究苦马豆素(SW)对肝癌细胞体外生长的作用记录和处理实验数据表

组别

（SW浓度/μg·mL-1）

初始细胞数

培养后存活细胞数

细胞存活率%

24h

48h

72h

24h

48h

72h

1（0.5）

2（1.0）

3（2.0）

4（4.0）

5（8.0）

6（16.0）

7（0）

（表格4分。不分7组扣1分，初始细胞数，培养后存活数，细胞存活率三栏不写各扣1分，24h、48h、72h没写扣1分，扣完为止） （3）不同浓度的SW溶液都能抑制癌细胞的增值，培养时间越长（2分） SW浓度越大，抑制作用越强。（2分）

【解析】

试题分析：该实验的目的是探究苦马豆素（SW）对肝癌细胞体外生长的作用，自变量加入SW的浓度，因变量是肝细胞的存活率，按照实验设计对照性原则和等量性原则。实验组共6组加入不同浓度（0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0μg/mL）的SW溶液，对照组加入等量的生理盐水，分别在培养24h、48h、72h时测定肝细胞的存活数，计算存活率。由于要计算存活率，所以需要测定起始活细胞数量；建立记录表时应体现出7组记录数据，应有初始细胞数、3个时段培养后存活细胞数和存活率等内容。分析坐标系内三条曲线的实验结果，不同浓度的SW溶液都能抑制癌细胞的增值，培养时间越长（2分） SW浓度越大，抑制作用越强。

考点：本题考查实验设计方面的问题，意在考查学生具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理，包括运用观察、实验与调查、假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法。