Question

（8分）受损伤的马铃薯细胞内酚氧化酶（PPO）和底物（酚类物质）直接接触，引起马铃薯的褐变，为探究温度对PPO活性的影响，实验小组进行如下实验：

（1）PPO粗提液的提取

低温下将新鲜马铃薯用蒸馏水洗净、去皮，取20g样品放入含50mL磷酸缓冲液（PH值为5.5）的研钵中，同时加入少量石英砂，研磨、离心、上清液即为PPO的粗提液，加缓冲液研磨的目的是            

（2）不同温度下PPO活性的测定

步骤顺序	试管1	试管2	试管3	试管4	试管5	试管61	试管7	试管8
PPO粗提液	2mL		2mL		2mL		2mL
酚类底物		2mL		2mL		2mL		2mL
反应	混合振荡	混合振荡	混合振荡	混合振荡
温度预处理（5min）	0℃	15℃	30℃	45℃
保温时间	5min	5min	5min	5min
记录结果	+	++++	++++	++

（注：反应底物充足；实验结果中“+”越多褐色越深）

①实验步骤顺序有不妥之处，请改正                         。

②实验结果表明：15℃和30℃温度条件，PPO具有相同的活性，从酶的特性分析其原因是       。

③为进一步探究PPO最适温度，应在                 范围内设置温度梯度。

Answer

（8分）（1）维持PH，保持PPO的活性（防止PPO失活，一定要写到“PPO活性”）

（2）①“反应”步骤改在“温度预处理”之后

②在酶的最适温度前后，可以有相同的催化效率（答题给分点“要写到酶有最适温度”和

“最适温度前后”）

③15℃~30℃

【解析】

试题分析：（1）酶容易变性失活，所以缓冲液是为了维持PH，保证PPO的活性

（2）①酶具有高效性所以反应的步骤应改正温度预处理之后。

②15℃和30℃温度条件，PPO具有相同的活性，从酶的特性分析其原因是温度对酶活性的影响呈倒钟型，在酶的最适温度前后有抗原相同的催化效率。

③由表可知在15℃和30℃时酶活性较高，因为褐色最深，所以为进一步探究PPO最适温度，应在15℃~30℃之间范围内设置更小的温度梯度。

考点：本题考查酶相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握和对数据分析能力。