Question

嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：

Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶

（1）PCR扩增bglB基因时，选用         基因组DNA作模板。

（2）如图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入            和           不同限制酶的识别序列。

Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响

（3）据图1、2可知，80℃保温30分钟后，BglB酶会              ；为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在              （单选）。

A.50℃     B.60℃      C.70℃      D.80℃

Answer

（1）嗜热土壤芽孢杆菌 （2）NdeⅠ BamHⅠ （3）失活 B

【解析】

试题分析：（1）由“嗜热土壤芽胞杆菌产生的β—葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶”可知bglB基因存在于嗜热土壤芽胞杆菌，因此可从嗜热土壤芽胞杆菌基因组文库中获取目的基因，然后采用PCR技术扩增bglB基因。

（2）在基因表达载体的构建中，目的基因插入到启动子和终止子之间，启动子和终止子之间有Ndel、XbaⅠ、BamHⅠ三种限制酶识别和切割位点。据图可知，终止子的两端有XbaⅠ限制酶切割位点，因此不能使用XbaⅠ限制酶切割质粒，故只能用Ndel和BamHⅠ限制酶切割质粒。目的基因与质粒具有相同的粘性末端才可以连接形成重组质粒，所以目的基因两端需分别引入Ndel和BamHⅠ的识别序列。

（3）根据图1可知，据图可知，在温度为80℃，酶失活；温度在60℃和70℃时，酶活性基本相等；根据图2可知，温度为60℃时酶的相对活性比70℃时的高；因此为高效利用BglB酶降解纤维素，可控制反应温度在60℃。

本题考查基因工程、酶、育种等知识，意在考查获取信息、利用信息及所学知识进行分析、判断的能力及识图能力

考点：本题考查基因工程和酶的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能从图形中获取信息、利用信息及运用所学知识进行分析、判断的能力。