Question

科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性，从而抑制肿瘤细胞生长增殖以寻找一种抑制肿瘤细胞增殖的新途径。

方法思路：

①构建干扰质粒________(插入针对人体端粒酶逆转录亚基(hTERT)的mRNA的干扰序列)和对照质粒PSG—CTR(插入不针对人体任何DNA序列的对照相序列)。

②用空质粒PSG(不含目的基因)、干扰质粒PSG—AS和对照质粒分别感染肝癌细胞。

③一段时间后观察检测细胞的________。计算细胞凋亡率，绘制肝癌细胞生长曲线。结果如下图：

请回答下列问题。

(1)完成实验步骤中的空格：

①________________；③__________________________。

(2)在构建质粒时，要将质粒导入大肠杆菌细胞并用________培养基进行筛选鉴定，然后再提取。因此，在构建的表达载体质粒上必须含有________。

(3)端粒酶可以通过以自身的________为模板，________为原料来合成端粒DNA。

(4)分析DNA载体途径的RNA干扰技术能否抑制肿瘤细胞？

________________________________________________________________

Answer

（1）①PSG—AS ③端粒酶活性、细胞凋亡情况、细胞生长情况

（2）选择 标记基因

（3）RNA 4种脱氧核苷酸

（4）从结果可知PSG—AS导入肝癌细胞发挥作用后，端粒酶活性降低，细胞凋亡率升高，细胞生长受抑制，说明通过DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶活性的方法，能较好地抑制肿瘤细胞。

【解析】（1）题干中指出干扰质粒PSG—AS。题图中有端粒酶活性、细胞凋亡率、细胞数(生长情况)，因此，端粒酶活性、细胞凋亡情况、细胞生长情况是检测指标。(2)标记基因用于筛选鉴定含有质粒的大肠杆菌，用选择培养基进行筛选鉴定。(3)端粒酶是逆转录酶，以自身RNA为模拟，以脱氧核苷酸为原料，合成端粒DNA。(4)从题图看出，PSG—AS组端粒酶活性低，细胞凋亡率高，细胞数增长缓慢，能较好地抑制肿瘤细胞。