Question

酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取；果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果，某实验小组取无菌烟草幼叶，切成相同大小的小片，等量放入6支试管中，试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。

试管编号 项目	I	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	V	Ⅵ
蒸馏水/mL	2	0	1	1	1	1
缓冲液/mL	0	2	1	0.5	0.5	0.5
果胶酶液/mL	0	0	0	0.5	0	0
蜗牛酶液/mL	0	0	0	0	0.5	0
纤维素酶液/mL	0	0	0	0	0	0.5
实验结果(绿色深浅程度)	－	－	－	＋＋＋	＋＋＋＋	＋＋

(注：“＋”越多表示绿色越深，“－”表示颜色无显著变化)

(1)实验过程中，需要轻摇试管，其目的是________，使原生质体从叶小片中游离出来，以便观察悬浮液绿色的深浅。

(2)从绿色的深浅可推测：蜗牛酶液酶解效果最好，原因是蜗牛酶液含有________________________等多种酶。该实验中________是空白对照组，其设置意义是________。

(3)用网筛过滤原生质体到离心管内，离心后收集沉淀物，并用_ _________________________洗涤。

(4)原生质体是否符合要求还需进行检验，其检验的方法是____________。

Answer

(1)为了使细胞壁与酶充分接触，提高酶解效果

(2)果胶酶和纤维素酶 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 排除无关变量的干扰 (3)等渗溶液

(4)低渗涨破法

【解析】本题考查有关酶的催化效率的实验。(1)实验过程中，需要轻摇试管，可以使细胞壁与酶充分接触，可以提高酶解效果。(2)蜗牛以植物为食，所以唾液酶中含有果胶酶和纤维素酶，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ没有添加酶溶液为空白对照组。其目的是排除无关变量的干扰。(3)离心后收集沉淀物，并用等渗溶液清洗，目的是保持细胞正常形态。(4)要用低渗涨破法来检验原生质体是否符合要求，若没有细胞壁则可以涨破，有则不能涨破。