Question

科研人员想研究“在胰岛素使用总量不变的前提下，胰岛素使用次数对同一组织不同细胞株克隆效率的影响”。请完成实验思路，并分析实验结果。

实验材料：M浓度胰岛素溶液(小鼠血浆昼夜平均胰岛素浓度)、培养液、小鼠皮肤生发层组织(能增殖)、胰蛋白酶、3种抗体、生理盐水等。

(要求与说明：答题时不考虑加入胰岛素溶液后的培养液体积变化等误差；不同浓度的胰岛素溶液加入细胞培养液的间隔时间为24小时；抗体能识别特定的膜蛋白质，但不损伤细胞)

(1)实验思路：

①向有小鼠皮肤生发层组织的培养液中加入    获得单细胞悬浮液，在每瓶中加入    从而获取3种特殊细胞，分别命名为细胞株1、2、3。

②将M浓度胰岛素溶液分别稀释到原浓度的1/2、1/3，备用。

③实验分组及操作。若实验在适宜条件下进行72小时，以细胞株1为例，将细胞株1均分为3份实验，请完成下列表格。

细胞株类型	胰岛素浓度	加入胰岛素次数	检测内容
细胞株1

(2)实验分析：

①本实验用克隆化细胞株而不是原代培养物作实验材料，原因是克隆化细胞株中的细胞具有   的特点，这样可以减少实验误差。

②按照上述实验操作，可能还会产生一定的误差，改进的办法是   。

Answer

（1）①胰蛋白酶 一种抗体

③

(2)①遗传性状均一，表现性状相似(或同性质/生理特征相同)

②每个实验组再增加若干样品（或重复上述实验步骤若干次），求平均细胞总数

【解析】

试题分析：

(1)①动物细胞培养时应该加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶以获得单细胞悬浮液，在传代培养时在3个瓶中加入3种不同的抗体从而获取3种特殊细胞。

③实验M浓度胰岛素溶液分别稀释到原浓度的1/2、1/3，所以细胞株1的3组实验胰岛素浓度分别是1、1/2、1/3，实验要求胰岛素总量不变，则加入胰岛素的次数分别是1、2、3次。

(2)①克隆化细胞株中的细胞具有遗传性状均一，表现性状相似的特点，保证了实验材料的相同。

②每个实验组再增加若干样品（或重复上述实验步骤若干次），求平均细胞总数，以减少实验产生的误差。

考点：本题考查动物细胞培养的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。