满分5 > 高中生物试题 >

下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙...

下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料,请分析回答下列问题。

资料1:巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌,能将甲醇作为其唯一碳源,同时AOX1基因也会因受到诱导而表达[5’AOX13’AOX1(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子]

资料2:巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒,所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体,其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组,将目的基因整合于染色体中以实现表达。

满分5 manfen5.com

(1)如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组,应该在HBsAg基因两侧的AB位置接上________________限制酶识别序列,这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。

(2)酶切获取HBsAg基因后,需用________将其连接到pPIC9K质粒上,形成重组质粒,并将其导入大肠杆菌以获取________

(3)步骤3中应选用限制酶________来切割重组质粒获得重组DNA,然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。

(4)为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功,在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选,转化后的细胞中是否含有HBsAg基因,可以用________方法进行检测。

(5)转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后,需要向其中加入________以维持其生活,同时诱导HBsAg基因表达。

 

(1)SnaBⅠ AvrⅡ (2)DNA连接酶 大量重组质粒 (3)BglⅡ (4)DNA分子杂交 (5)甲醇 【解析】(1)重组质粒上的目的基因若要表达,需要目的基因的首尾含有启动子和终止子。而SnaBⅠ、AvrⅡ识别的序列在启动子与终止子之间,只要在目的基因两侧的A和B位置分别接上这两种序列,并用SnaBⅠ、AvrⅡ这两种限制酶对质粒和目的基因同时进行切割,便会各自出现相同的黏性末端,便于重组与表达,同时可防止自身环化,因此在HBsAg基因两侧的A和B位置应接上SnaBⅠ和AvrⅡ限制酶的识别序列。 (2)①用DNA连接酶可将切割后的HBsAg基因和pPIC9K质粒连接成重组质粒;②将重组质粒导入大肠杆菌体内,目的是利用大肠杆菌的无性繁殖,短时间内获取大量的重组质粒。(3)重组DNA的两侧分别是启动子和终止子,除BglⅡ外,其他限制酶均会破坏含有启动子、终止子的目的基因。 (4)可用DNA分子杂交技术检测巴斯德毕赤酵母菌内是否导入了目的基因。 (5)资料1显示,甲醇为该酵母菌的唯一碳源,同时可诱导HBsAg基因表达。  
复制答案
考点分析:
相关试题推荐

甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有AB的新型药用植物。

回答下列问题:

(1)为了培育该新型药用植物,可取甲和乙的叶片,先用________酶和________酶去除细胞壁,获得具有活力的________,再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成________组织,然后经过________形成完整的杂种植株。这种培育技术称为______________

(2)上述杂种植株属于多倍体,多倍体是指_______________ _______________。假设甲与乙有性杂交的后代是不育的,而上述杂种植株是可育的,造成这种差异的原因是_____________________

(3)这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的____________________等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。

 

查看答案

下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述,正确的是(   )

满分5 manfen5.com

A是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞

B中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成

C同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性

D是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群

 

查看答案

从某海洋动物中获得一基因,其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物,首先要做的是(   )

A.合成编码目的肽的DNA片段

B.构建含目的肽DNA片段的表达载体

C.依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽

D.筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽

 

查看答案

为了验证甲状腺激素具有促进机体新陈代谢的作用,以耗氧量为测定指标,请你根据以下提供的实验材料与用具,设计实验步骤和表格,将预期的实验结果填入表中。

材料与用具:体重相同的正常同龄雌性小鼠若干只、适宜浓度的甲状腺激素溶液、生理盐水、耗氧量测定仪等。

(要求:答题时具体注射剂量不作要求)

(1)实验步骤:

______________________________________________________________________________________________________________________

(2)设计一张表格,将预期的实验结果填入表中。

 

查看答案

为了探究光照强度和CO2浓度对植物光合作用强度的影响,甲、乙两个研究学习小组的同学用相同方法、相同装置对AB两种植物进行了实验,获得的实验结果如下表所示,请据表分析回答问题。

甲组:A植物在不同条件下单位时间内O2释放量/mL

CO2浓度

灯泡的功率(单位:W)

20

50

75

100

200

300

0.1%

3.4

16.0

28.2

40.5

56.5

56.5

0.03%

2.3

11.2

19.8

27.6

27.5

27.6

乙组:B植物在不同条件下单位时间内O2释放量/mL

CO2浓度

灯泡的功率(单位:W)

20

50

75

100

200

300

0.1%

2.6

9.1

19.5

55.7

75.6

102.6

0.03%

1.8

8.4

18.9

54.2

75.2

101.8

(1)甲组的实验方案中自变量是________,实验中需要控制的主要无关变量是________

(2)分析表格数据可知,当A植物在灯泡功率为100 WCO2浓度为0.03%时,可以采取________的措施来显著提高光合作用强度。

(3)B植物在CO2浓度为0.1%时,若将灯泡功率由300 W逐渐增大至400 W,请预测O2释放量的变化趋势:

__________________________________________________________________________

_________________________________________

(4)上表中测得的O2释放量并非光合作用实际产生的氧气量,这是因为_______________________________________________________

(5)在阳光不充足地区,大棚种植AB两种植物时,光照最可能成为限制________植物正常生长的主要生态因素。菜农往往通过在大棚内养殖蘑菇来提高AB两种植物的产量,采用这种方法增产效果更好的植物是________

 

查看答案
试题属性

Copyright @ 2008-2019 满分5 学习网 ManFen5.COM. All Rights Reserved.