Question

【生物技术实践】(15分)

某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。

(1)采样与培养：将采集的土样混匀后称取1 g，置于经过灭菌处理的________(填“固体”或“液体”)培养基中，28℃振荡培养。

(2)接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行________处理。之后，将菌液涂布接种于以________ 为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计________作为空白对照。

(3)筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是________，则说明此种菌能够____________________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用________法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。

Answer

(1)液体  (2)系列稀释(或“梯度稀释”) 淀粉 倒置 未接种的空白培养基(或“接种等量无菌水的培养基”)  (3)出现透明圈 分泌淀粉酶使淀粉发生水解 平板划线

【解析】

试题分析：（1）土壤中微生物的采集，需用液体培养基进行培养。

（2）为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行系列稀释处理。然后将菌液涂布在以淀粉为唯一碳源的选择培养基上，然后进行倒置平板，置于适宜的条件下进行培养。为排除其他因素的影响，提高实验可信度，需设计未接种的空白培养基(或“接种等量无菌水的培养基”) 作为空白对照。

（3）筛选所需要的微生物，可将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围出现透明圈，表明此种菌能够分泌淀粉酶使淀粉发生水解。若进行纯化培养，可进行平板划线法。

考点：本题考查微生物培养的相关知识，意在考查考生理解和掌握微生物培养知识的要点，能够正确进行生物实验能力。