(16分)玉米的光合效率较水稻的高,这与玉米中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)有很大的关系。如何将玉米的这一种酶转移到水稻等植物上一直是植物生物学家的研究课题之一。但实践证明,常规杂交育种手段很难如愿以偿。最近,有人利用土壤农杆菌介导法,将完整的玉米PEPC基因导入到了水稻的基因组中,为快速改良水稻的光合作用效率,提高粮食作物产量开辟了新途径。
(1)玉米和水稻很难利用常规杂交手段杂交是因为 。
(2)获得PEPC基因后,将其导入土壤农杆菌的质粒中,获得重组质粒需要的工具酶是 ,请在下框中补充某DNA片段并画出切割形成黏性末端的过程示意图。
(3)导入完成后得到的土壤农杆菌,实际上只有少数导入了重组质粒,可根据质粒中含有的 筛选出成功导入了重组质粒的土壤农杆菌。
(4)用含有重组质粒的土壤农杆菌感染水稻细胞,即使感染成功,PEPC基因通过一定途径整合到水稻的基因组中,但不一定会表达,原因最可能是 。
A.玉米和水稻不共用一套密码子
B.水稻中缺乏合成PEPC的氨基酸
C.PEPC基因受到水稻基因组中相邻基因的影响
D.整合到水稻基因组中的PEPC基因被水稻的某种酶破坏了
(5)PEPC基因在水稻细胞中成功表达的标志是 。
如目的基因完成了表达 ,则其表达过程可表示为 。
(6)得到PEPC基因成功表达的水稻细胞后,科研人员常采用 方法获得转基因水稻植株。
下表为常用的限制性核酸内切酶(限制酶)及其识别序列和切割位点,由此推断的以下说法
正确的是( )
限制酶名称 |
识别序列和切割位点 |
限制酶名称 |
识别序列和切割位点 |
BamHⅠ |
G↓GATCC |
KpnⅠ |
GGTAC↓C |
EcoRⅠ |
C↓AATTC |
Sau3AⅠ |
↓GATC |
HindⅡ |
GTY↓RAC |
SmaⅠ |
CCC↓GGG |
(注:Y=C或T,R=A或G)
A.限制酶切割后不一定形成黏性末端
B.限制酶的切割位点一定在识别序列的内部
C.不同限制酶切割后一定形成不同的黏性末端
D.一种限制酶一定只能识别一种核苷酸序列
现有一长度为3000碱基对(bp)的线性DNA分子,用限制性核酸内切酶酶切后,进行凝胶电泳,使降解产物分开。用酶H单独酶切,结果如图l。用酶B单独酶切,结果如图2。用酶H和酶B同时酶切,结果如图3。该DNA分子的结构及其酶切图谱是( )
基因工程中构建重组质粒时,用同一种限制性内切酶切割DNA,被水解的磷酸二酯键至少
A.2个 B.4个 C.6个 D.8个
已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点,如下图中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断,则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子,若在每个DNA分子上至少有一个酶切位点被该酶切断,则理论上讲,经该酶酶切后,这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是( )
A.3 B.4 C.9 D.12
对下图所示粘性末端的说法正确的是( )
A.甲、乙、丙黏性末端是由两种限制性核酸内切酶作用产生的
B.图乙中的酶切位点在A与G之间
C.如果甲中的G发生突变,限制性核酸内切酶可能不能识别该切割位点
D.构建重组DNA分子所用的限制性核酸内切酶和DNA连接酶分别作用于a处和b处