(7分)现有甲、乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质，利用动物细胞培养的方法能够鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请完成下列实验报告：
Ⅰ.实验材料：小白鼠胚胎。
Ⅱ.药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、细胞培养箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。
Ⅲ.实验原理： 。
根据这些变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值)，可判断该化学物质的毒性。
Ⅳ.实验步骤：
(1)制备细胞悬浮液：
把小白鼠胚胎进行处理离散成单个细胞后，加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。
（2）进行细胞培养：
①取A、B、C三个洁净的培养瓶，分别加入等量的细胞悬浮液。
② 。
③C瓶不作处理，作为对照。
把三个培养瓶放在37℃(或适宜温度)的细胞培养箱中培养
（3）制作临时装片：
①当细胞繁殖到大约第8代左右时，同时取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使细胞从瓶壁上脱落，加入动物细胞固定液杀死细胞并固定其分裂相。
②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的悬浮液。滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央，加1～2滴适宜浓度的 染色，3～5min后，盖上盖玻片，制成临时装片。
（4）镜检和统计：把临时装片放在显微镜下，按照 的顺序观察，寻找处于有丝分裂 期的细胞，观察其染色体，并与小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片对比以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占该细胞总数的百分数(Q值)。
V.实验结果：
|
培养瓶 |
A |
B |
C |
|
Q值 |
1.3％ |
12.5％ |
0.1％ |
VI.实验结论： （2分）。
(9分)下图为酿制葡萄酒的两个简易装置，请分析回答：
(1)是（反应式） ；为了提高果酒品质，可利用 法或 法对菌种进行纯化，然后将纯净的酵母菌菌种直接加入果汁。
(2)甲装置中NaHCO3溶液的作用是 ；在发酵过程中，必须进行的操作是 。
(3)果汁发酵后是否有酒精产生，可用 来检验，在酸性条件下，该试剂与酒精反应呈 色。
(4)酿造果酒时，由于灭菌不严格果汁中可含有醋酸杆菌；在酒精发酵旺盛时，升高温度，能否发生醋酸发酵？ ，理由是： 。
(8分)奶牛场每天排放大量的粪便、饲料残渣，如不处理会严重影响周边人、畜的饮水安全等。下图是某奶牛场将以上废弃物置于水中制成的废水后进行处理的流程图，请回答：（氧化塘中以及前部植物比后部要少）
(1)输入此氧化塘的能量有 ；如果把图示系统看作是一个生态工程，它体现了 原理、 原理等。
(2)氧化塘的主要成分是 ，氧化塘后部的溶解氧含量比前部的 。
(3) 厌氧池中的微生物主要作用是 ；如废弃氧化塘 演替
(4)废水不能过量流入氧化塘，否则会破坏该生态系统的平衡，这一事实说明 。
(8分)控制哺乳动物的性别对于畜牧生产有着十分重要的意义。目前,分离精子技术是有效的性别控制方法。例如:牛的X精子的DNA含量比Y精子的高出4%左右,利用这一差异人们借助特殊仪器将它们分离开来,再通过胚胎工程技术就可培育出所需性别的试管牛(如下图所示)。
根据以上信息回答下列相关问题:
(1)过程①通常采用体外受精技术，受精前采集的卵细胞需在体外培养到 期，精子可以用 法或培养法使之获能。
(2)在受精过程中精子首先要穿越的结构是 ；防止多精入卵的两道屏障分别是透明带反应和 。
(3）胚胎移植能够成功，原因之一是因为早期胚胎在母体内处于 状态 ；另外受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生 反应,为胚胎在受体内的存活提供了可能。
(4）如想得到更多优良后代，可在 期进行胚胎分割。为了确保得到所需性别的试管牛，往往需要对移植前的胚胎进行性别鉴定，请举出一种对早期胚胎进行性别鉴定的方法(只需写出名称或简要原理)： 。
(9分) 图甲为“番茄—马铃薯”的培育过程示意，图乙为利用小鼠制备乙肝病毒单克隆抗体过程，根据图示回答问题：
(1)图甲的培养基中除了含有一定的营养物质之外,还必须含有 从而促进脱分化和再分化；分化的实质是 。
(2)图甲中要培养突变体通常选择 细胞进行处理，原因是 ，从理论上说杂种植株应该同时具有番茄和马铃薯两种生物的性状，因为 。
(3)图乙在获得B淋巴细胞之前，对小鼠进行的处理是 ，使小鼠发生 反应，生成相应细胞。
(4)图乙所示①②③④过程表示筛选过程的有 ，两个过程中均有细胞杂交，依据的原理是 。
(8分)我国基因工程药物的研制和生产发展迅猛，下图是利用基因工程方法生产人生长激素的示意图。pBR322质粒为基因工程中经常选用的载体，Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因，该质粒上有限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ的识别和切割位点，如图（已知普通大肠杆菌中不含有pBR322质粒上任何基因；限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同）。回答问题：
(1)过程②为 ，质粒上的抗性基因作用是 。
(2)为防止④过程中出现多种重组质粒，一般用两种限制酶分别对目的基因和质粒进行剪切，从而把目的基因和质粒各自剪切出 (不同／相同)的黏性末端。基因表达载体中目的基因除包含以上所描述的结构外，还必须含有 。
(3)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ中的任意两种，同时对多个质粒pBR322进行切割，则形成的DNA片段共 种；为提高⑤过程成功率，常用 溶液处理大肠杆菌。
(4)现在用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322，完成过程④、⑤后，将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置，一段时间后，菌落的生长状况如上图所示。甲培养基上能生长的大肠杆菌中含有 基因，与丙相比，乙培养基中少了两个菌落，说明丙培养基中这两个菌落中的大肠杆菌 。
