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(10分)长期以来 ,香蕉生产遭受病害的严重威胁 ,制约了其发展。目前 ,随着转...

(10分)长期以来 ,香蕉生产遭受病害的严重威胁 ,制约了其发展。目前 ,随着转基因抗病香蕉基因工程技术的日趋成熟 ,为培育抗病香蕉品种开辟了新途径。转基因抗病香蕉的培育过程如图所示,质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答:

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(1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶              ,对           进行切割。

(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A中含有                ,作为标记基因。

(3)能使抗病基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是:         (填字母序号)。

A启动子   B终止子  C 复制原点   D标记基因

(4)将目的基因导入植物细胞常用方法有多种,图中所示方法为               。

(5)欲检测目的基因是否表达成功,可采用的技术              (填字母序号)。

A. 核酸分子杂交        B. 基因序列分析    C. 抗原-抗体杂交   D. PCR

(6)利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成转基因植株。香蕉组织培养的培养基中除了含有一定的营养物质外还必须含有                    等植物激素,它们会在          (填图中标号)阶段发挥作用,同时      (填图中标号)阶段还需要给予一定光照。

(7)从香蕉组织块到获得转基因抗病香蕉试管苗的过程中,需经过        。(填数字)

①无丝分裂    ②有丝分裂   ③减数分裂   ④ 原代培养   ⑤ 传代培养

⑥ 植物体细胞杂交   ⑦ 细胞融合     ⑧ 脱分化      ⑨ 再分化

 

(1)PstⅠ、EcoRⅠ(答全给分)含抗病基因的DNA、质粒(答全给分)(2)抗卡那霉素基因    (3)AB   (4)农杆菌转化法   (5) C  (6) 生长素和细胞分裂素    ①和②    ②    (7)②⑧⑨ 【解析】 试题分析:根据图示,选用限制酶切割时不能破坏抗病基因,所以应选用PstⅠ和EcoRⅠ对含有抗病基因的DNA和质粒进行切割。因为培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,所以如果想利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A中含有抗卡那霉素基因,以便作为标记基因,进行筛选。抗病基因必需具有调控序列:启动子和终止子,才能在香蕉细胞中特异性表达。将目的基因导入植物细胞的方法有:农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。图中采用的是最常用的农杆菌转化法。检测目的基因是否成功表达,可采用的方法有DNA分子杂交技术、分子杂交技术、抗原-抗体杂交技术。植物组织培养的培养基中需要的植物激素是:生长素和细胞分裂素,在①脱分化和②再分化中发挥重要作用,在②再分化过程中需要给予一定的光照,利用芽的分化。从香蕉组织块到获得转基因抗病香蕉试管苗的过程中,需经过②有丝分裂、⑧脱分化、⑨再分化。 考点:本题考查基因工程、植物组织培养技术的应用,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。
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考点分析:
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(7分)克隆猪成功率较低,与早期胚胎细胞的异常凋亡有关。Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因,用PCR技术可以检测该基因转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。克隆猪的培育及该基因转录水平检测流程如图。

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请回答:

(1)图中①过程采用的技术手段称做                 技术。

(2)②过程所用的培养液与植物组织的培养基从成分上主要区别是前者必须含有             

(3)在PCR过程中可检测出cDNA中Bcl-2 cDNA的分子数,进而计算总mRNA中Bcl-2 mRNA的分子数,从而反映出Bcl-2基因的转录水平。

①图中X表示              过程。

②从基因组数据库中查询Bcl-2 mRNA的核苷酸序列,以便根据这一序列设计合成2种         用于PCR扩增,除此以外在PCR反应体系中还应包含的主要成分有扩增缓冲液、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA以及                 

③PCR扩增过程第一轮循环的模板是               

(4)克隆猪的成功培育说明                                      。

 

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(8分)由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。

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(1)图甲中,过程①需要的酶有____                __。为达到筛选目的,平板内的固体培养基应以______作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次,目的是___                                     __

(2)某同学尝试过程③的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是________________;推测该同学接种时可能的操作失误是______________

(3)以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,接种_______菌的发酵罐需要先排气,其原因是_____          _____________________

(4)若要对培养液中的酵母菌进行计数,下表是取0.1ml菌液进行涂布时,不同稀释倍数下统计的平板培养基上的菌落数:

稀释倍数

103

104

105

重复

实验

1

1498

126

12

2

1208

128

9

3

1189

133

6

根据表中数据估算培养液中酵母菌的浓度约为_______        个/ml  

 

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(10分)洋葱是观察植物细胞的有丝分裂常用的实验材料,现有已经培养一段时间后的洋葱,请回答下列问题

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(1)实验中取材非常关键,应取洋葱           作为观察部位。为观察染色体形态,需要用         染色;为染色体计数,应选取        期细胞进行观察。

(2)上图为观察到的部分细胞分裂图像,在细胞②中可看到在           处形成了              ,与其形成有密切关系的细胞器是             。按照细胞周期的过程,①—⑥所示细胞,发生的先后顺序为                       

(3)细胞周期分为间期和分裂期(M期)两个阶段,间期又分为G1期、S期和G2期,其中S期为DNA复制期,G1期和G2期合成相应的蛋白质。

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Ⅰ.若实验中统计了600个细胞,测定每个细胞的DNA含量,统计结果如图。处于S期的细胞是       (B、C、D),G2期和M期的细胞有        个。

Ⅱ.若一个细胞周期总时间为20小时,处于M期的细胞数为30个,则该细胞完成分裂间期需要              小时。

 

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(8分)下图为蔬菜大棚中测定的相关数据,请分析并回答以下问题

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(1)图示种植黄瓜的密闭大棚内,一昼夜空气中的CO2含量变化。其中A~B段CO2相对含量升高是因为植物的___________,影响B~D段CO2相对含量下降的主要环境因素是___________,在一天当中植物有机物积累量最多是在曲线的______点,C点时细胞产生ATP的场所为________________________

(2)据图乙,光照由450nm波长的光转为550nm后,其他条件不变,叶绿体类囊体膜上的ATP产量将会_______,暗反应中_______量将会增加。

(3)用大小相似的黄瓜叶片进行光合作用实验:已知叶片实验前重量,在不同温度下分别暗处理1h,测其重量变化,立即再光照1h(光强相同),再测其重量变化,得到如下结果:

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①以下叙述正确的是(         )(说明:净光合速率=总光合速率-呼吸速率)

A.温度为29℃时该植物光合作用强度最高    B. 温度为29℃时该植物呼吸作用最强

C.27℃的净光合速率为4mg/h               D.30℃时总光合速率为3mg/h

②若对植物进行光照10小时,温度为29℃,再黑暗14小时,温度为27℃,则24小时中有机物的积累量为____________mg。

 

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(7分)下图为某细胞的部分结构及蛋白质转运示意图,图中箭头表示蛋白质转运方向,请回答下列问题:

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(1)图中具有双层膜的结构有               。细胞膜选择透过性的分子基础是           具有疏水性和          具有专一性。

(2)据图可知,细胞膜成分更新所需的物质直接由       运输,该结构在细胞内运输大分子物质的过程,验证了生物膜具有        的结构特性。

(3)若该细胞是高等植物的叶肉细胞,则图中未绘制的细胞器有                 

(4)研究表明硒对线粒体膜有稳定作用,由此推测人体缺硒时受损程度最小的是         (填序号)。

①癌细胞     ②成熟的红细胞     ③心肌细胞      ④胰腺细胞

 

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