Question

（8分）由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。

（1）图甲中，过程①需要的酶有____                __。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以______作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是___                                     __。

（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是________________；推测该同学接种时可能的操作失误是______________。

（3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种_______菌的发酵罐需要先排气，其原因是_____          _____________________。

（4）若要对培养液中的酵母菌进行计数，下表是取0.1ml菌液进行涂布时，不同稀释倍数下统计的平板培养基上的菌落数：

稀释倍数	10^3	10^4	10^5
重复 实验	1	1498	126	12
2	1208	128	9
3	1189	133	6

根据表中数据估算培养液中酵母菌的浓度约为_______        个/ml  

Answer

（1）限制性核酸内切酶、DNA连接酶 （答全给分）   淀粉      进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌    （2）稀释涂布平板法     涂布不均匀   （3）工程酵母      工程菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强，导致酒精发酵产生CO2的速率更快    （4）1.29×107

【解析】

试题分析：（1）基因工程中需要的酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶。为了筛选得到了可高效利用淀粉的酵母菌菌种，培养基应该以淀粉作为唯一的碳源。②、③过程重复几次，目的是进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌。（2）根据乙图，采用的接种方法是稀释涂布平板法，由于菌落分布不均匀，可能是在接种时没有做到涂抹均匀。(3)由于工程酵母菌分解淀粉产生葡萄糖的能力更强，在密闭发酵时产生CO2的速率更快，所以在接种工程酵母菌时需要先进行排气处理。（4）根据表中数据估算培养液中酵母菌的浓度约为1.29×107个/ml。

考点：本题考查基因工程、微生物培养的应用，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。