(14分)生长因子通常是指具有刺激细胞生长的多肽类物质,主要通过与细胞膜上特异性的受体结合,来调节细胞生长及相关的功能。请根据以下提供的实验材料与用具,来研究内皮生长因子(VEGF)和胎盘生长因子(PIGF)对小鼠干细胞分化的影响,完成以下问题。
实验原理:
VEGF和PIGF均能促进干细胞生长,干细胞分化后细胞内 会明显增加,可用 判断干细胞是否分化。
实验材料:
怀孕的小鼠,干细胞培养液、VEGF试剂、PIGF试剂、生理盐水、细胞培养瓶、检测试剂盒、CO2培养箱等。(要求与说明:答题时不考虑加入试剂后的体积变化等误差。)
实验思路:
(1)在 条件下,取出小鼠胚胎的肝脏,用机械法剪碎至1mm3大小的组织块,再用适当的方法获得干细胞悬浮液。
(2)取动物细胞培养瓶,平均分成若干组,并标号,每组设置若干个重复,每个培养瓶 。
(3) 。
(4)在 中培养一段时间后,用试剂盒检测培养液中Akt蛋白含量,统计并分析所得数据。
预测结果:请用柱形图表示支持VEGF试剂和PIGF试剂能共同促进小鼠干细胞分化的实验结果。
(12分)科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高,可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点,下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因),其中①~④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤,Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图作答:
(1)在构建基因表达载体时,可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接,在此实例中,应该选用限制酶 分别对 进行切割,切割后产生的DNA片段分别为 种。
(2)培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长,要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞,应使基因表达载体Ⅰ中含有 作为标记基因。
(3)研究人员通常采用 法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。
(4)利用组织培养技术将导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的 过程。
某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉,其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述,错误的是( )
A、消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害
B、在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂,可获得染色体加倍的细胞
C、出芽是细胞再分化的结果,受基因选择性表达的调控
D、生根时,培养基通常应含α—萘乙酸等生长素类调节剂
下列关于哺乳动物胚胎工程的叙述中,正确的是( )
A、囊胚的内细胞团细胞和滋养层细胞功能上的差异是基因选择性表达的结果
B、胰蛋白酶处理卵裂球获得的细胞可直接移植到同期发情受体的子宫中继续发育
C、胚胎干细胞核移植可得到一群性状完全相同的个体
D、从卵巢中取出的卵母细胞与获能后的精子在专用的受精溶液中完成受精作用
下列关于胚胎工程的叙述,正确的是( )
A、经激素处理卵巢,使其超数排卵可获得成熟的卵细胞
B、精子在精巢中发育成熟并获能
C、胚胎移植的最适宜时期是发育到8细胞以上的胚胎,如早期囊胚
D、分割后的胚胎或细胞必须在体外培养到囊胚阶段才能移植到受体内
美国耶鲁大学的玛戈特和彼得斯进行了一个老鼠生命组合的实验。他们把第三次卵裂的黑、白、黄鼠(其配子都含15条染色体)的各一个胚胎提取而制成了一个“24胞组合胚胎”,再经过胚胎移植后,不久一只身披三色皮毛的组合鼠就问世了。以下说法中,正确的是( )
A、“24胞组合胚”细胞进行有丝分裂中期赤道板上排列90条染色体
B、若黑、白、黄毛性状由一对等位基因控制,则“组合鼠”同时具备三种基因型
C、“组合鼠”的后代有可能是黑、白、黄性状或三色组合性状
D、与黑、白、黄鼠相比,“组合鼠”是一个能够稳定遗传的新品种