Question

（8分）以下为人工合成reAnti基因，转入猪成纤维细胞，做成转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答

(1) 人工合成的reAnti基因可通过________      _________技术手段迅速扩增。

(2)过程③要将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞的方法是                      ，重组质粒导入之后，可通过                技术，来检测reAnti基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上。

(3)从猪中取胎儿成纤维细胞，用                         处理，然后进行分散培养。培养时，将培养瓶置于含                                      的混合气体培养箱中进行培养，培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，一般还应添加                           。

(4)去核前的卵母细胞应培养到                         期。其去核后与成纤维细胞通过电刺激后融合，形成重组细胞。再利用物理或化学方法刺激，使之完成细胞分裂和发育，在体外培养成重组早期胚胎。

(5)在进行过程⑦操作前，应利用激素对受体母猪进行______________ _______处理。

Answer

（1）PCR    (2)显微注射法   DNA分子杂交 

（3）胰蛋白酶  95%的空气和5%CO2  动物血清    （4）减数第二次分裂中期  （5）同期发情

【解析】

试题分析：（1）外源基因的快速扩增可通过PCR技术获得。

（2）导入动物细胞常用的方法使显微注射法，检测目的基因是否导入可用DNA分子杂交法。

（3）将动物细胞分散开需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，培养时要放入到95%的空气和5%CO2培养箱中，培养液中除了营养物质外还要添加动物血清。

（4）卵母细胞培养到减数第二次分裂中期，才能培养成早期胚胎。

（5）在进行胚胎移植前对受体同期发情处理。

考点：本题考查动物细胞培养和核移植相关知识，意在考察考生对知识点的掌握及综合运用的能力。