Question

（15分）请回答下列有关生物工程的问题：

（1）对于基因工程来说，其核心步骤是                ，若要培育能从乳汁中分泌人的干扰素的转基因牛，需要选择的受体细胞是____________(受精卵、乳腺细胞)，导入该细胞最有效的方法是                。为了让转入的干扰素基因高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的             和             之间。

（2）植物体细胞杂交过程中，在把植物细胞杂交之前，必须用____________去除细胞壁，杂交过程的另一个环节是__________________；培育出诸如“番茄—马铃薯”这样的杂种植株利用了植物细胞全能性的原理。胚胎干细胞也有类似的特性，并且胚胎干细胞在体外培养的条件下，可以增殖而不发生        。

（3）在进行单克隆抗体的生产过程中，要把两种细胞进行融合，这两种细胞一种是在体外能够大量增殖的             ，另外一种是已免疫的B细胞；诱导该两种细胞融合常用的因素有PEG、        、灭活病毒等。体外培养的过程中，贴壁生长的细胞会出现_________现象。

（4）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其             。另外，培养的卵母细胞需要发育至                             期，为使雌性个体一次排出多枚卵母细胞，常采用             激素进行处理。

（5）“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成“无废弃物农业”，这主要是遵循生态工程的             原理。

Answer

（1）基因表达载体的构建     受精卵   显微注射法   启动子   终止子（2）纤维素酶和果胶酶    原生质体间的融合    分化（3）骨髓瘤细胞    电激  接触抑制（4）获能  减数第二次分裂中     促性腺激素、（5）物质循环再生

【解析】

试题分析：

（1）基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。受体细胞是动物细胞时，常选择受精卵作为受体细胞。将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法。为了让转入的目的基因高效表达，需要把目的基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间。

（2）在植物细胞杂交之前，必须用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体；再诱导原生质体融合获得杂合的原生质体。胚胎干细胞具有发育的全能性，且能在体外培养的条件下只增殖不分化。

（3）已经免疫的B细胞能产生抗体，但在体外培养条件下不能无限增殖；骨髓瘤细胞能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生特定的抗体。所以在进行单克隆抗体的生产过程中，要把这两种细胞进行融合，形成既能产生抗体，又能在体外培养条件下无限增殖的杂交瘤细胞。诱导动物细胞融合常用的因素有PEG（化学方法）、电激（物理方法）、灭活病毒（生物方法）等。体外培养的过程中，贴壁生长的细胞会出现接触抑制现象。

（4）精子和卵细胞在受精前都有一个准备阶段，即精子要进行获能处理；卵母细胞需要发育至减数第二次分裂中期。常常给雌性个体注射促性腺激素，使其超数排卵。

（5）“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量，能使物质在生态系统中循环往复，分层分级利用，形成“无废弃物农业”，这主要是遵循生态工程的物质循环再生原理。

考点：本题考查基因工程、细胞工程、胚胎工程和生态工程的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。