Question

（10分）Ⅰ、将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。

请根据以上图表回答下列问题：

（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是                          。

（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？__________。

（3）图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？   。

（4）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为               。（2分）

Ⅱ、继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：

（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是                。

（2）进行基因转移时，通常要将外源基因转入         中，通常采用          技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。

（3）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的                  （2分）细胞中特异表达。

Answer

Ⅰ⑴耐高温  ⑵引物对B  ⑶否  ⑷农杆菌（2分）

Ⅱ⑴显微注射  ⑵受精卵（或早期胚胎）、DNA杂交  ⑶膀胱上皮

【解析】

试题分析：Ⅰ⑴ PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶具有耐高温的特性。⑵引物B中含C与G的碱基对较多，可采用较高的退火温度。⑶多种限制酶切割，形成不同的切割位点，所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列就没有专一性要求。⑷植物基因工程中常用农杆菌做受体细胞。（5）据图分析，用到了EcoR I酶和Alu I酶切割抗原DNA片段产生了X、Y两个片段，而用EcoR I酶和SmaI酶切割质粒产生了 M、N两个片段，且M、N片段间存在Pst I酶切点。因此再用EcoRⅠ和PstⅠ酶切割这两片段形成的重组质粒，由于保留了Pstl的切割位点，所以可以得到两种DNA分子。而用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切重组质粒中，如图I-②过程只能产生一种DNA片断。Ⅱ基因工程所用的基本工具有限制性内切酶、dna连接酶和运载体，其中，常用的运载体是质粒，也可用噬菌体衍生物和动植物病毒。在动物细胞工程中，若将动物组织分散成单个细胞，常用胰蛋白酶和胶原蛋白酶来处理；若进行核移植，需先对卵母细胞培养到mⅱ中期并做去核处理；动物细胞的培养需要无菌无毒条件，一定的营养条件，血浆血清和o2、co2气体条件，其中的气体co2主要用于维持培养液的ph。在动物胚胎工程中，常用促性腺激素处理雌性个体而使其超数排卵；常采用核移植和早期胚胎培养技术获得重组胚胎，并进一步培育出克隆动物，常采用胚胎分割并移植技术获得更多的优良个体。

考点：Ⅰ本题考查运用PCR方法扩增目的基因的有关知识以及图解的识别能力，尤其是限制酶的作用是解答本题的难点和关键点。Ⅱ本题综合考查基因工程的基本工具、动物细胞工程和胚胎工程的基础知识，考查识图、获取信息与处理信息的能力。通过图形对限制酶作用的特点来加深对知识理解和掌握。