Question

（12分）科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。过程如下图，据图回答：

（1）过程①表示采取         的方法来获取目的基因。

（2）形成图中②含有目的基因的DNA（重组质粒）需要的酶包括：         和              。

（3）基因工程中常用的载体除有质粒外，还有          。重组质粒包括启动子、           、        及终止子等部分。

（4）图中③过程用人工方法，使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，一般将受体大肠杆菌用     处理，使细胞成为            ，从而使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。检测大肠杆菌B是否导入了质粒或重组质粒，可采用的方法是将得到的大肠杆菌B涂布在含有          的培养基上，若细菌能够生长，说明：已导入了重组质粒或普通质粒A，理由：               。

（5）基因工程的第四步中,检测目的基因是否插入受体细胞的染色体DNA上、检测目的基因是否翻译成蛋白质，用到的技术分别是         、          。

Answer

(1)反转录法    （2）限制性核酸内切酶、DNA连接酶

（3）λ噬菌体的衍生物（动植物病毒）  目的基因  标记基因

（4）氯化钙  感受态细胞  （氨苄）青霉素  普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因

（5）DNA分子杂交技术    抗原-抗体杂交技术

【解析】

试题分析：（1）由RNA来获得DNA用的是反转录法。

（2）运用的工具酶有限制性核酸内切酶和DNA连接酶。

（3）常用的运载体有质粒、动植物病毒、λ噬菌体的衍生物。重组质粒必须包含启动子，终止子，目的基因和标记基因。

（4）用氯化钙处理大肠杆菌细胞可以使其处于感受态状态。因本题上有2个标记基因，但抗四环素基因被插入的基因破坏掉了，因此剩下的是抗氨苄青霉素抗性基因，如果在含氨苄青霉素的培养基上能生长，说明已经导入了重组质粒或普通质粒A，因为普通质粒和重组质粒都含有抗氨苄青霉素的基因。

（5）目的基因检测在DNA水平上可用DNA分子杂交技术，是否翻译成蛋白质用抗原-抗体杂交技术。

考点：本题考查基因工程相关知识，意在考察考生对知识点的掌握及对信息提取分析运用能力。